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細(xì)胞培養(yǎng),既包括微生物細(xì)胞的培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)得到大量的細(xì)胞或其代謝產(chǎn)物。
細(xì)胞培養(yǎng)的流程見下詳細(xì)介紹:
1 、 從動(dòng)物組織切割、分離所需培養(yǎng)的組織(原代培養(yǎng));
2 、 用滅菌PBS多次清洗組織,充分剪碎組織,用滅菌PBS清洗組織;
3 、 靜置數(shù)分鐘,使組織沉淀于管底,棄上清;
4 、 *充分消化組織,棄上清;
5 、 加入含小牛血清或胎牛血清的培養(yǎng)基,置于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng);
6 、 從CO2培養(yǎng)箱取出生長(zhǎng)狀態(tài)良好的單層原代培養(yǎng)細(xì)胞或傳代培養(yǎng)細(xì)胞,于超凈工作臺(tái)中棄去培養(yǎng)液,用滅菌PBS清洗;
7 、 加入適量*消化液,靜置片刻;
8、 倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化狀態(tài),如變圓,立即棄去消化液,加入培養(yǎng)液終止消化;
9 、 終止培養(yǎng),去除培養(yǎng)上清液;
10 、 反復(fù)吹打培養(yǎng)液,制成單細(xì)胞懸液,分置于多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿,進(jìn)行傳代培養(yǎng);
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