Caco-2细胞,人结肠腺癌细胞 返回列表页

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产品名称：Caco-2细胞,人结肠腺癌细胞

产品用途：科研
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产品特点：活性好、存活率高、实验成果特征明显
产品来源：人组织、小鼠组织、大鼠组织、兔组织等动物组织
产品运输：免费快递
产品包装：瓶装
产品用途：细胞培养研究
下面是有关细胞株，菌株培养的具体无菌技术：
1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminar flow） 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作台面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面的*无菌区域，勿在边缘的非无菌区域操作。
3. 小心取用无菌的实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或容器瓶口，亦不要在打开的容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4. 工作人员应注意自身的安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染的细胞株应特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台（至少Class II）。操作过程中，应避免引起aerosol 的产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头的伤害等。
5. 定期检测下列项目：
5.1. CO2 钢瓶的CO2 压力
5.2. CO2 培养箱的CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染（水盘的水用无菌水，每周更换）。
5.3. 无菌操作台内的airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000 小时/HEPA）。
6. 水槽可添加消毒剂（Zephrin 1:750），定期更换水槽的水。

Caco-2细胞,人结肠腺癌细胞传代方法：细胞*汇合时，倒掉旧液，加入消化液（0.25%*+0.03%EDTA）2ml消化，显微镜下观察细胞*脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉*，加培养基混匀分瓶，T25瓶中加培养基至6-8ml，T75瓶加培养基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培养。
邮购备注： 收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若有悬浮的细胞，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清，刚接到细胞时血清浓度可以在15％。本产品经过了细菌、真菌、霉菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原体检测。
我们将为客服提供全面的细胞计数、细胞染色、（MTT）比色法、细胞培养、细胞污染、常规生物材料细胞毒性实验等等细胞实验技术服务。
细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
具体操作 （一）实验前准备： 1．将水浴锅预热至37℃ 2．用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。 3．在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
（二）取出冻存管： 1．根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。 2．从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。
（三）迅速解冻： 1．迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。 2．约1-2min后冻存管内液体*溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。
（四）平衡离心：用架盘天平平衡后，放入离心机中3000r/min 离心3min。
（五）制备细胞悬液： 1．吸弃上清液。 2．向离心管内加入10ml培养液，吹打制成细胞悬液。 （六）细胞计数： 细胞浓度以5×105/ml为宜。
（七）培养细胞 将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内，将培养瓶放入37℃和5％CO2的培养箱内2-4小时（或者24-48小时）后换液继续培养培养，换液的时间由细胞情况而定。
初学者易犯错误： 1．水浴锅未预热或者未预热到37℃。 2．水浴锅内冻存管太多，导致传热不佳，使融化时间延长。 3．离心前忘记平衡，导致离心机损坏和细胞丢失。 4．一次复苏细胞过多，忘记更换吸头和吸管，导致细胞交叉污染。
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