產(chǎn)品介紹:

中文名稱：mTOR抑制劑(Torin 2)

英文名稱：Torin 2

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號(hào)：FS-X10647

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

糙皮側(cè)耳Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TOP2A Antibody法尼基轉(zhuǎn)移α(FNTα)

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti- Antibody發(fā)動(dòng)蛋白3(DNM3)

棲土光黑殼Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TOLLIP Antibody發(fā)動(dòng)蛋白1(DNM1)

秦氏蜜環(huán)菌Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TOP2A Antibody二?；视?DAG)

短小芽孢桿菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TOR1A Antibody二酰甘油-O-酰基轉(zhuǎn)移同源物2(DGAT2)

釀酒酵母Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TP53BP1 Antibody二酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移同源物1(DGAT1)

灰(色)大孢鏈霉菌PE標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TP53 Antibody(PB0076)二羰基/L-木糖還原(DCXR)

變異白蟻菌生物標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TP63 Antibody二肽3(DPEP3)

伯克霍爾德菌辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗羊IgMAnti-TP63 Antibody二肽2(DPEP2)

茯苓P0辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TP73 Antibody二肽基肽Ⅳ(DPP4)

類諾卡氏菌屬膠體金標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPH1 Antibody二肽基肽9(DPP9)

藤黃微球菌生物標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPH1 Antibody二肽基肽8(DPP8)

銹蘑Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TP73 Antibody(PB0232)二肽基肽7(DPP7)

爪甲曲霉Cy5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TP63 Antibody(PB0164)二肽基肽6(DPP6)

茶擬盤多毛孢Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPOR/MPL Antibody二肽基肽3(DPP3)

雙氮纖維單胞菌Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPO Antibody二肽基肽10(DPP10)

B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體腸炎沙門氏菌亞利桑那亞種人卵巢組織提取物

成對(duì)螺旋細(xì)絲蛋白抗體Sphingobiumjaponicum人牙周膜組織提取物

植烷氧化抗體Sphingobiumrhizovicinum人胰腺癌組織提取物

蛋白二硫鍵異構(gòu)P4HB抗體長赤細(xì)菌人體直腸癌組織提取物
mTOR抑制劑(Torin 2)新疆黃桿 無水化镥彈性蛋白

紅蠟盤 化鑭,無水膠原蛋白

根瘤 一氧化硅III型膠原蛋白

東方伊薩酵母 水蘇四糖,四水生長;分化因子8

湖沉積物紫色小桿 4-氟-3-低密度脂蛋白

盤多毛孢 苯戊酮高密度脂蛋白

不動(dòng)桿 基硅烷磺酯乙酰CoA羧化

辣乳菇 (R)-(-)-1-Cbz-3-羥基吡咯烷組織蛋白L  

白僵 S-1-芐氧羰基-3-羧基吡咯組織蛋白B

露濕漆斑 9,10-雙苯乙炔基蒽組織蛋白D

子午線假單胞 1,4-二甲氧基萘過氧化物

葡萄牙假絲酵母 嘧啶-5-甲μ-鈣激活

大麗花輪枝孢（棉花黃萎?。?/span> (2--4-吡啶基)甲布魯氏桿IgG抗體

臭曲霉 N-Phenylhydroxylamine相關(guān)糖蛋白

信州靈芝 2'-溴-4'-氟苯乙酮硫雌酮