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PI3K抑制劑

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更新時間:2022-05-18 10:27:13瀏覽次數(shù):155次

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貨號 FS-X10250
PI3K抑制劑正在熱銷的產(chǎn)品:ISR- Alpha /FITC(Insulin Receptor- Alpha) 熒光標(biāo)記胰島受體抗體蘇丹Ⅳ AR
ISR- Alpha protein/FITC 熒光標(biāo)記胰島受體-α蛋白抗體IgG蘇丹Ⅳ ,≥96.0% (HPLC),用于食品分析
ISR- Beta /FITC 熒光標(biāo)記胰島受體-β抗體IgG硅鎢,二十六水 AR
ISR- Alpha pro

中文名稱:PI3K抑制劑

英文名稱:3-Methyladenine

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號:FS-X10250

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:3-Methyladenine

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg

3-Methyladenine是一種選擇性的PI3K抑制劑,能夠作用于Vps34和PI3Kγ,IC50值為25μM和60μM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:5142-23-4

別名:3-MA

純度:99.84%

分子量:149.15

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

Luteolibacter甲型流感病血凝抗體(H2N2)Human SGK1 大鼠 Klotho 免疫試劑盒

小葉相思根瘤菌人巨病UL49蛋白抗體Human SFI1 倉鼠

類諾卡氏菌屬人類白抗原E抗體Human SGEF 倉鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒

梭菌屬E3連接抑制受體3抗體Human SF4 倉鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

蘇云金芽胞桿菌亞亞種P1抗體Human SFMBT2 倉鼠脂氧A4(LXA4)免疫試劑盒

叢毛紅曲肝生長因子抗體Human SFPQ 倉鼠脂聯(lián),含C1Q和膠原域(ADIPOQ)免疫試劑盒

東方伊薩酵母組蛋白去乙?;?/span>2抗體Human SFRS14 倉鼠載脂蛋白B(APOB)免疫試劑盒

釀酒酵母人乙肝病Large S蛋白抗體Human SETMAR 倉鼠血紅氧合1(HO-1)免疫試劑盒

蠟樣芽孢桿菌HER4抗體Human SERPIND1(Serpin family D member 1) 倉鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)免疫試劑盒

 禽白血病病原基因1/bri3結(jié)合蛋白抗體Human SF3A1 倉鼠色P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)免疫試劑盒

淡紫青霉肝病核心抗原C區(qū)抗體Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) 倉鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒

印度芽孢桿菌型肝炎病-NS1抗體Human SETDB2(Histone-lysine N-methyltransferase SETDB2) 倉鼠瘦(LEP)免疫試劑盒

洋蔥伯克霍爾德氏菌型肝炎病-NS3抗體Human SERPINB8 倉鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

絨毛栓菌型肝炎病-NS4a抗體Human SERPINB12 倉鼠可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒

丁梭菌A型病H5N1-M2蛋白抗體Human SERPIND1(Serpin family D member 1) 倉鼠可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒

中華根瘤菌透明質(zhì)/玻璃抗體Human SERPINB9 倉鼠巨噬遷移抑制因子(MIF)免疫試劑盒

炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%秦皮

洋蔥伯克霍爾德氏菌Burkholderia│cepacia 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品高麗槐

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%紫蓳靈
PI3K抑制劑熱帶假絲酵母 氟洛芬網(wǎng)鈣蛋白3

鴨疫里氏桿 3-乙基-4-甲基-3-吡咯啉-2-酮抗線粒體抗體M2-3E

松針散斑殼 4-氟-2-27-羥基膽固

根瘤 5-甲基喹啉24-羥基膽固

威爾酵母 巰基乙異辛酯Wnt-10b蛋白

謝瓦散囊 2-甲苯甲酰肼布魯頓酪激

小克銀漢霉C0 2-甲基-1,3-環(huán)戊二酮內(nèi)源性

植物乳桿 2-氨基-3-溴-5-吡Osterix蛋白

魚乳桿 7-羥基異喹啉CXC趨化因子配體13

卷枝毛霉卷枝變型 1,11-十一烷二N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖

毛柄(金針菇) 二乙二二乙烯基羰基化蛋白

黑曲霉 壬酰鞘氨

大腸桿 二乙酯端粒

大腸埃希氏 化鈀磷二酯4

粗皮側(cè)耳(平菇) 2,3,5-三氟吡啶L-乳脫氫A鏈

 


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