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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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VCP/p97抑制劑(NMS-873)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 16:27:16瀏覽次數(shù):188次

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貨號(hào) FS-X10591
VCP/p97抑制劑(NMS-873)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:SSTR2 (somatostatin receptor 2) 生長(zhǎng)抑受體2抗原DL-N-酰高半胱氨硫內(nèi)脂 99%
SSTR3 peptide 生長(zhǎng)抑受體3抗原異 >93.0%(GC)
SSTR5 (somatostatin receptor 5) 生長(zhǎng)抑受體5抗原異 CP,98.0%
STAT1(signal transducers

產(chǎn)品介紹:

nMS-873是一種有效的,選擇性的VCP/p97抑制劑,在1mM ATP條件下,IC50值為20nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):1418013-75-8

純度:99.93%

分子量:520.67

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱:VCP/p97抑制劑(NMS-873)

英文名稱:NMS-873

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10591

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

紅球菌絲蛋白抑制劑B11抗體Anti-PPBP Antibody金屬硫蛋白4(MT4)

中山小短桿菌絲蛋白抑制劑B3抗體Anti-PPBP Antibody金屬硫蛋白3(MT3)

肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種絲/蘇蛋白激SIK2抗體Anti-PPCS Antibody金屬硫蛋白1X(MT1X)

詹氏桿菌神經(jīng)元特異性蛋白3抗體Anti-PPBP Antibody金屬硫蛋白1M(MT1M)

非無(wú)菌藥品  需氧菌總數(shù) 豬霍亂沙門(mén)氏菌抗體Anti-PPBP Antibody金屬硫蛋白1L(MT1L)

釀酒酵母增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體Anti-PPIA Antibody金屬硫蛋白1H(MT1H)

Maribius salinus沙門(mén)氏菌抗體(多型)Anti-PPIB Antibody金屬硫蛋白1G(MT1G)

雞傷門(mén)氏菌鼠傷門(mén)氏菌Anti-PPID Antibody金屬硫蛋白1F(MT1F)

大腸埃希氏菌甲型副傷門(mén)氏菌抗體Anti-PPID Antibody金屬硫蛋白1E(MT1E)

釀酒酵母絲/精相關(guān)核基質(zhì)蛋白1抗體Anti-PPIB Antibody金屬硫蛋白1B(MT1B)

斯托克青霉絲/精相關(guān)核基質(zhì)蛋白2抗體Anti-PPID Antibody金屬硫蛋白1(MT1)

雙歧雙歧桿菌鴨沙門(mén)氏菌抗體Anti-PPIG Antibody金屬磷酯1(MPPE1)

梅氏弧菌轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DEC2抗體Anti-PPL Antibody金屬泛激蛋白1(MPS1)

總狀共頭霉鞘激2抗體Anti-PPM1A Antibody解整合金屬蛋白9(ADAM9)

果生鏈核盤(pán)菌絲/蘇蛋白激3抗體Anti-PPM1D Antibody解整合金屬蛋白8(ADAM8)

纖維単胞菌鏈親和抗體Anti-PPM1E Antibody解整合金屬蛋白33(ADAM33)

乙?;D(zhuǎn)移10抗體Chitinophagarupis小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞提取物

/蘇蛋白激Nek7抗體Deinococcusaquatilis小鼠滑膜細(xì)胞提取物

神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)蛋白1抗體Chitinophagapinensis小鼠骨骼肌細(xì)胞提取物

/蘇蛋白激NEK1抗體紫色色桿菌小鼠成骨細(xì)胞提取物
VCP/p97抑制劑(NMS-873)彎孢 (R,R)-(-)-N,N′-雙(3,5-二叔丁基亞水楊基)-1,2-環(huán)已二β內(nèi)酰

香栓 (S,S)-(+)-N,N′-雙(3,5-二-叔丁基亞水楊基)-1,2-環(huán)已二線粒體呼吸鏈復(fù)合物II

耐久腸球 N-芴甲氧羰基-N'-三苯甲基-D-組維甲結(jié)合蛋白

豌豆根瘤 化羅丹明110保幼二激

雷蘑 吖啶黃G己糖激

枇杷炭疽病 2,4-二-5-嘧啶滯育

大腸埃希 6-三氟甲基保幼二激

乳乳球乳亞種 化銩(III)無(wú)水色

根瘤 溴化釹(III)甘露糖-6-P異構(gòu)

Marisediminicola 溴化鐠(III)GDP-D-甘露糖焦磷化

長(zhǎng)孢黃色鏈霉 3-氨基-5-溴吡啶磷甘露糖變位2

核盤(pán) 4-氨基-3-溴吡啶乙酰

瓜枝孢(黃瓜黑星?。?/span> 磷二氫鋁纖維蛋白溶

繩狀曲霉 1,2-雙(二甲基硅烷基)乙烷β-N-乙酰葡萄糖糖

大腸埃希 溴化釤(III),六水絲;蘇蛋白激3

 


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