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Src激酶家族抑制劑(SU6656)

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更新時間:2022-05-23 16:40:56瀏覽次數(shù):145次

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貨號 FS-X11011
Src激酶家族抑制劑(SU6656)正在熱銷的產(chǎn)品:PKB(Mouse protein kinase B) ELISA Kit 小鼠蛋白激B對二氨苯 CP
sIgA(Mouse secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 小鼠分泌型免疫球蛋白A對二氨苯 ACS, 99%
HO-2(Mouse heme oxygenase 2) ELISA Kit 小鼠血紅氧合

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

中文名稱:Src激酶家族抑制劑(SU6656)

英文名稱:SU6656

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X11011

產(chǎn)品介紹:

SU6656是Src激酶家族抑制劑,對Src、Yes、Lyn和Fyn的IC50值分別為280、20、130和170nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:330161-87-0

純度:98.24%

分子量:371.45

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

香菇Pseudomonas chlororaphis大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)

枯草芽孢桿菌枯草亞種Pseudomonas chlororaphis大鼠抗內(nèi)皮抗體(AECA)

微球菌Pseudomonas azotoformans大鼠抗內(nèi)皮抗體(AECA)

馬勃狀硬皮馬勃Pseudomonas chlororaphis大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)

擬隱孢殼屬Pseudomonas chlororaphis大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)

炭疽芽胞桿菌Pseudomonas chlororaphis大鼠牛小腸堿性磷(CIAP)

17Pseudomonas chlororaphis大鼠牛小腸堿性磷(CIAP)

類諾卡氏菌屬Pseudomonas chlororaphis大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)

深褐芽孢桿菌Pseudomonas chlororaphis大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)

華農(nóng)產(chǎn)黃細菌Pseudomonas cichorii大鼠克拉拉蛋白(CC16)  

豬肺炎支原體(可訂購)Pseudomonas chlororophis大鼠克拉拉蛋白(CC16)  

土生叢毛單胞菌Pseudomonas cichorii大鼠腎上腺(EPI)

假單胞菌Pseudomonas chlororophis大鼠腎上腺(EPI)

靈芝Pseudomonas cichorii大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)

總狀毛霉Pseudomonas corrugata大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)

假長雙歧桿菌假長亞種Pseudomonas corrugata大鼠補體蛋白3(C3)

piwi樣1蛋白抗體檸檬色短小桿菌性磷(ACP)比色法測試盒

血小板源性生長因子-B抗體蠟質(zhì)芽孢桿菌堿性磷(ALP)比色法測試盒

血小板源性生長因子受體A抗體PDGFRα淀粉液化芽孢桿菌肌激(CK)比色法測試盒

色上皮源性因子抗體冬青節(jié)桿菌氫-鉀ATP比色法測試盒
Src激酶家族抑制劑(SU6656)產(chǎn)氣莢膜梭       C型 1-萘-4-磺鈉

大腸埃希氏 草酰乙酯

木耳951 4-(三氟甲基)苯甲

表皮葡萄球 25-脫氫升麻 3-O-beta-D-木糖

葡萄汁酵母 2,4-二甲基吡咯

沙福芽孢桿 6-羥基 3,6,7-三葡萄糖

戴爾福特 5-羥色鹽鹽

枯草芽孢桿 5,6,7,4'-四羥基黃酮 6,7-二葡萄糖

拉曼傘形霉 4-乙基-2-甲氧基

猴頭 白花前胡香豆精II

突尼斯葉桿 對香豆

大腸埃希 白花前胡香豆精I

球孢鏈霉 復(fù)合穩(wěn)定劑APD

玫煙色棒束孢 姜狀三七R1

大腸埃希氏 復(fù)合穩(wěn)定劑DPD
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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