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EZH2甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(GSK503)

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更新時間:2022-05-23 14:11:47瀏覽次數(shù):171次

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貨號 FS-X10766
EZH2甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(GSK503)正在熱銷的產(chǎn)品:LP Ab-IgM (Human Legionella antibody IgM) ELISA Kit 人軍團菌抗體IgM酰氧酯 96%
LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) ELISA Kit 人軍團菌抗體IgG間 98%
Human paramyxovirus parotitis IgM E

產(chǎn)品介紹:

GSK503是高效特異性的EZH2甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑,Kiapp值為3到27nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1346572-63-1

純度:99.29%

分子量:526.67

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

中文名稱:EZH2甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(GSK503)

英文名稱:GSK503

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10766

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

香菇(親和純化) 馬IgMAnti-HTR1D Antibody人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)

靈芝(親和純化) 猴IgGAnti-HTR1F Antibody人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)

蘇云金芽胞桿菌(親和純化) 豬IgGAnti-HTR1F Antibody人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)

銅生金球菌水貂IgG (親和純化)Anti-HTR4 Antibody人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)

枯草芽孢桿菌(親和純化) 大鼠IgGAnti-HTR5A Antibody人谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)

紫棕炭團菌(親和純化) 大鼠IgMAnti-HTR4 Antibody人谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)

解淀粉芽孢桿菌炭疽沉淀血清(馬來源)Anti-HTR4 Antibody人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)

pET-44c健康皮張?zhí)烤铱乖瑼nti-HTR5B  Antibody人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)

*美味牛肝菌兔抗抗血清Anti-HTR6 Antibody人抗淋巴球蛋白(ALG)

白色噬瓊膠菌兔抗熒光抗血清Anti-HTT Antibody人抗淋巴球蛋白(ALG)

大豆慢生根瘤菌兔抗HRP抗血清Anti-HTR6 Antibody人抗(AT)

乳粉孢兔抗人IgA抗血清Anti-HTRA2 Antibody人抗(AT)

鞘盒菌屬兔抗人Kappa鏈抗血清(k-鏈抗血清)Anti-HUNK Antibody人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)

空腸彎曲桿菌兔抗人IgG(γ-鏈)恒定區(qū)抗血清Anti-HUS1B Antibody人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)

牛艾美耳球蟲牛血清白蛋白抗血清Anti-ICAD Antibody 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)

大腸埃希菌熒光Cy7標(biāo)記兔IgG(流式同型對照)Anti-IAPP Antibody人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)

固攜帶蛋白2抗體絲球毛霉人鼻咽癌細胞

SPOP蛋白抗體球孢毛霉人宮頸永生化鱗狀細胞

維甲相關(guān)孤兒受體α抗體直立毛霉人脛骨肉瘤細胞

組織相容性復(fù)合物RTF1抗體兩型孢毛霉小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞與大鼠膠質(zhì)瘤細胞之融合細胞
EZH2甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(GSK503)分枝節(jié)桿 3-氟苯硫白介6

小毛克孢屬 pH7.6磷鹽緩沖液腫瘤壞死因子β

畢赤酵母 pH6.8磷鹽緩沖液腫瘤壞死因子α

根瘤 MMO-MUG培養(yǎng)基白介10

腸埃希氏 聚(1,4-丁二丁二)酯鑰孔蟲戚血藍蛋白

黏液鞘氨單胞 N,O-雙(基硅烷基)三氟乙酰鑰孔蟲戚血藍蛋白IgG抗體

慢生根瘤 TPY肉湯瘦

黃色籃狀 TPY液體培養(yǎng)基腎上腺

蠟狀芽孢桿 豬支原體培養(yǎng)基促甲狀腺

釀酒酵母 N,O-雙(基硅烷基)三氟乙酰脂多糖

腸膜明串珠葡萄聚糖亞種 霉液體培養(yǎng)基1,25-二羥基維生D3

印度洋鏈霉 RS培養(yǎng)基(RS瓊脂平板)1-3-β-D葡聚糖

釀酒酵母 DKW培養(yǎng)基17-羥皮質(zhì)類固

韓國污泥單胞 GVC增液25羥基維生D3

黃溶鏈霉 BSSA培養(yǎng)基4-羥基壬烯

 


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