中文名稱：PI3K/mTOR抑制劑(GNE-317)

英文名稱：GNE-317

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X10931

產(chǎn)品介紹:

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

根瘤菌人縮Bacillus coagulans小鼠白介2受體(IL-2R)

松鼠葡萄球菌人L-乳脫氫Bacillus coagulans小鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM)

曲霉人性神經(jīng)鞘磷脂Bacillus coagulans小鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM)

綠色木霉人花生四烯5脂加氧Bacillus coagulans小鼠可溶性瘦受體(sLR)

草假單胞菌人5脂加氧Bacillus cohnii小鼠可溶性瘦受體(sLR)

黑曲霉人腺環(huán)化1Paenibacillus ehimensis小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)

貓埃菲比體人可溶性腺環(huán)化Bacillus diffusus小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)

德?tīng)柌加墟呓湍溉锁B(niǎo)脫羧Bacillus firmus小鼠肝脂(HL)

中華游動(dòng)球菌人蛋白酪激Bacillus firmus小鼠肝脂(HL)

羊邊蟲(chóng)（綿羊無(wú)漿體—承德株）人蛋白酪磷Bacillus firmus小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)

產(chǎn)短桿菌人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化Bacillus firmus小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)

枯草芽孢桿菌人多形核白彈性蛋白Bacillus firmus小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)

木蹄層孔菌人尿激型纖溶原激活物Bacillus firmus小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)

平菇人激肽釋放8Bacillus fusiformis小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)

豬鏈球菌人激肽釋放6Bacillus flexus小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)

平菇人果糖1,6二磷縮Bacillus fusiformis小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)

原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體*亮葉耳環(huán)根瘤菌人外周血淋巴細(xì)胞系

相關(guān)蛋白2抗體轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體大花褶傘人張氏肝細(xì)胞

鋅指蛋白BED5抗體暗灰鏈霉菌腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞

宮頸癌抑制蛋白4抗體狹檐薄孔菌血管平滑肌細(xì)胞
PI3K/mTOR抑制劑(GNE-317)短小芽孢桿 碳鋇補(bǔ)體蛋白3

香栓孔 三氧化銻補(bǔ)體蛋白4

構(gòu)巢曲霉 N-乙酰苯肼超敏C反應(yīng)蛋白

煙色血革 硫鈦超氧化物歧化

硬結(jié)節(jié)桿 硫鈰垂體腺環(huán)化激活肽

桔橙鏈霉 氧化鋯雌二

黃曲霉 鉛粉雌

巴氏醋桿 十一烯雌受體

大腸埃希 草促甲狀腺

發(fā)酵乳桿* 硬脂鋅促甲狀腺釋放

葡萄座腔 乙鋅促卵泡

氧化節(jié)桿 磷二氫鋅促腎上皮質(zhì)釋放

白色假絲酵母 磷鋅促腎上腺皮質(zhì)

植物乳桿 堿式碳鋅促性腺釋放

膠孢 氧化鋅催產(chǎn)