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貨號	FS-X10414

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中文名稱：ATR抑制劑(VE-822)

英文名稱：VE-822

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號：FS-X10414

產(chǎn)品介紹:

英文名稱：VE-822

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

VE-822是一種ATR抑制劑，Ki值<0.2nM，也抑制ATM，Ki為34nM。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：1232416-25-9

別名：VX-970

純度：99.22%

分子量：463.55

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

棉毛狀嗜熱霉血小板源性生長因子AA+BB抗體Anti-ARSA Antibody白介2受體(IL2R)

釀酒酵母前列腺EP1受體抗體Anti-Arsb Antibody白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)

Albidiferax脯水解4抗體Anti-ASIC2 Antibody白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)

釀酒酵母性核磷蛋白32家族B抗體Anti-ASIC2 Antibody白介29(IL-29)

矮小微桿菌程序性死亡2樣抗體Anti-ASIC1 Antibody白介28B(IL-28B)

乳酪短桿菌豬藍(lán)耳病病M蛋白抗體Anti-ASAH1 Antibody白介28A(IL-28A/IFN-λ2)

pMIR-Report Luciferase蛋白體PSMα3抗體Anti-ASIC2 Antibody白介27(IL-27)

三葉草根瘤菌蛋白體PRS10B抗體Anti-ASIC3 Antibody白介26(IL-26)

三葉草葉桿菌蛋白體PSMD3抗體Anti-ASL Antibody白介25(IL-25)

乳鏈球菌腦蛋白4抗體Anti-ASS1 Antibody白介24(IL-24)

缺陷短波單胞菌磷化蛋白體PSMα3抗體Anti-ASPH Antibody白介23受體(IL-23R)

大豆慢生根瘤菌抑癌蛋白DLP1Anti-ASXL1 Antibody白介23A(IL-23A)

土曲霉原變種蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移1抗體Anti-ASXL1 Antibody白介23(IL-23)

芽胞桿菌鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激1β/CaMKIβ抗體Anti-ATF1 Antibody白介22(IL-22)

慢生根瘤菌激-M2抗體Anti-ATF2 Antibody白介21(IL-21)

棒形小克銀漢霉原鈣粘蛋白β7抗體Anti-ATF1 Antibody(PB0098)白介2(IL-2)

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

產(chǎn)氣氣桿菌Aerobacter│aerogenes 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
ATR抑制劑(VE-822)長雙歧桿雙(4-叔丁基苯基)5羥色2A

釀酒酵母三氟化四絡(luò)合物5羥色2C

Edaphobacter sp. 5-氟間二甲苯AP核內(nèi)切-1

根瘤屬 4-三氟甲硫基DNA指導(dǎo)聚合γ1

膠孢 4,4,4-三氟-1-丁DNA指導(dǎo)聚合γ1

醋桿屬 1,1,1-三氟-3-烷雌酮

Corynebacterium variabile corrig. (Müller ) Collins 1-己基-3-甲基咪唑三氟甲磺鹽脂褐

病研所芽孢桿 (1R,2R)-(-)-2-氨基-1-苯基-1,3-鋅-α2糖蛋白

曲霉平展變種 (1R,2R)-1,2-環(huán)己烷二甲HtrA絲肽3

姬松茸1號* 4-甲氧苯重氮四氟鹽Ⅳ型前膠原

木霉 2-溴嘧啶糖基化低密度脂蛋白

尖鐮孢 5-溴嘧啶心肌損傷標(biāo)志物cTnI

豬鏈球分型血清參考品血清型 SS18 6--2’-脫氧核神經(jīng)絲蛋白

4－氟苯硫脲性別決定區(qū)Y框蛋白2

蘇云金芽胞桿以色列亞種 BOC-L-天門冬酰 4-酯孕
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)