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PI3Kγ抑制劑(IPI549)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 11:48:31瀏覽次數(shù):221次

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貨號 FS-X10350
PI3Kγ抑制劑(IPI549)正在熱銷的產(chǎn)品:S100A13/FITC 熒光標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgGBOC-β-氨 98%
Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC 熒光標(biāo)記化S6核糖體蛋白抗體IgG叔丁氧羰-L-天冬氨-4-叔丁酯 99%
Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244)

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:IPI549

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

IPI549是一種有效的選擇性PI3Kγ抑制劑,IC50為16nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1693758-51-8

純度:99.14%

分子量:528.56

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱:PI3Kγ抑制劑(IPI549)

英文名稱:IPI549

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10350

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

芽胞桿菌ATCC 9372;(曾用名:枯草芽胞桿菌黑色變種)單酰甘油脂肪抗體Human SESN1(Sestrin-1) 利尿肽(KP)

枯草芽孢桿菌致癌基因n-Myc抗體Human GHRH(Somatoliberin) 冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白(CIRBP)

戊糖乳桿菌多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體Human CGB(CGβ(Chorionic Gonadotrophin Beta) ) 冷球蛋白(CG)

枯草芽孢桿菌線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) 類粘蛋白2(ORM2)

拱狀靈芝蛋白激MST2抗體Human SFRP2(Secreted frizzled-related protein 2) 類粘蛋白(ORM)

*灰葡萄孢DNA結(jié)合蛋白C抗體Human IFNGR1(Interferon gamma receptor 1) 類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)

Chitinophagaceae sp.胃粘液抗體Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) 類肌腱蛋白c(TNC)

巴氏醋桿菌巴氏亞種促黑激γ抗體Human CSTA(Cystatin-A) 類肌腱蛋白(TN)

阪崎腸桿菌抗體Human NAA20(N-alpha-acetyltransferase 20) 類固抗體(SCA)

類干酪乳桿菌結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) 類風(fēng)濕因子(RF)

囊狀匐柄霉組織相容性復(fù)合體β抗體Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) 類白抗原G(HLA-G)

香菇Myc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) 類白抗原E(HLA-E)

蘇云金芽孢桿菌糖蛋白gp330抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) 類白抗原C(HLA-C)

人參土地桿菌磷化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體Human SESN1(Sestrin-1) 類白抗原B27(HLA-B27)

Rhizobium vitis造血祖激1抗體Human GHRH(Somatoliberin) 類白抗原A(HLA-A)

大腸埃希氏桿菌絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human PDE4B(cAMP-specific 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 4B) 雷帕霉靶蛋白(mTOR)

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR楊

型副傷門氏菌Salmonella│paratyphiA 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR,日本進(jìn)口分裝麝香
PI3Kγ抑制劑(IPI549)細(xì)枝孢 (-)-10,2-樟腦磺內(nèi)??购四ぬ堑鞍?10抗體

嗜麥芽黃單胞 (1R,2S)-(+)-2,10-樟腦內(nèi)磺??购诵◇w抗體IgG

樟疫霉 (1S)-(+)-樟腦-10-磺??辜谞钕龠^氧化物抗體

簡青霉 (-)-10-樟腦磺酰抗甲狀腺球蛋白抗體

Enterobacter sp. 辛可寧鹽鹽水合物抗性磷

鼠李糖乳桿 L-(-)樟腦磺抗性磷5b

平流層芽孢桿 辛可尼定抗內(nèi)皮抗體

黃曲霉 (S)-4--3-羥基丁乙酯抗凝血Ⅲ

植物乳桿植物亞種 (R)4--3-羥基丁乙酯抗平滑肌抗體

玉黑粉 膽固甲酯抗神經(jīng)節(jié)脂抗體

香菇 辛可寧抗雙鏈DNA抗體;天然DNA抗體

葡萄座腔 (+)-10-樟腦磺抗胰島受體抗體

亞褐鈸孔 (-)二異松蒎基烷可溶性CD36

*百脈根根瘤 (2S,8aR)-(-)-(樟腦磺酰)啞可溶性CD40配體

多主葡萄殼 辛可尼定硫鹽二水合物可溶性E選擇

 


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