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Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 16:37:09瀏覽次數(shù):185次

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貨號 FS-X10600
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VWF (Von Willebrand Factor) 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原S-異硫脲硫鹽 98%
Wnt1 信號通路Wnt1抗原5-氧-2-巰苯并咪唑 98%
WWOX

產(chǎn)品介紹:

GDC-0068是一種選擇性的Akt廣譜抑制劑,作用于Akt1/Akt2/Akt3,IC50分別為5/18/8nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1001264-89-6

別名:Ipatasertib;RG7440

純度:98.0%

分子量:458.0

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

中文名稱:Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)

英文名稱:GDC-0068

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10600

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

焦曲霉磺酰脲類藥物受體1抗體Anti-PTPRF Antibody棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2)

潘泰萊里亞島鹽單胞菌突觸泡蛋白2A抗體Anti-PTPRC Antibody(PB0115)激肽原1(KNG1)

膠孢突觸融合蛋白1抗體Anti-PXN Antibody激肽釋放原(PK)

寡養(yǎng)單胞菌磷化核突觸蛋白α抗體Anti-PYY Antibody激肽釋放結(jié)合蛋白(KAL)

其他質(zhì)粒磷化核突觸蛋白α抗體Anti-PYY Antibody激肽釋放9(KLK9)

橄欖產(chǎn)色鏈霉菌離子轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白SLC7A9抗體Anti-PYROXD1 Antibody激肽釋放8(KLK8)

蠟樣芽孢桿菌乙酰轉(zhuǎn)運蛋白1抗體Anti-PTTG1 Antibody激肽釋放7(KLK7)

梭狀芽孢桿菌滑膜肉瘤X斷點蛋白5抗體Anti-PVRL1/NECTIN1 Antibody激肽釋放6(KLK6)

釀酒酵母腫瘤/抗原11.3抗體Anti-RAB10 Antibody激肽釋放5(KLK5)

茶樹菇外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白1抗體Anti-RAB11A Antibody激肽釋放4(KLK4)

青春雙歧桿菌唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集11抗體Anti-RAB11B Antibody激肽釋放3(KLK3)

布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗抗原Sema6A抗體Anti-RAB13 Antibody激肽釋放2(KLK2)

香菇S100A9抗體Anti-RAB14 Antibody激肽釋放15(KLK15)

哈茨木霉單羧轉(zhuǎn)運蛋4抗體Anti-RAB18 Antibody激肽釋放14(KLK14)

假單胞菌*神經(jīng)降壓受體3抗體(糖蛋白95)Anti-RAB27A Antibody激肽釋放13(KLK13)

黑曲霉轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體Anti-RAB27A Antibody激肽釋放12(KLK12)

蛋白激C結(jié)合蛋白NELL1抗體巨孢鏈霉菌小鼠子宮成纖維細胞提取物

蛋白激C結(jié)合蛋白NELL2抗體利迪鏈霉菌小鼠卵巢上皮細胞提取物

腦特異性跨膜蛋白抗體鏈霉菌小鼠子宮平滑肌細胞提取物

環(huán)一螺旋蛋白1抗體TG1 Strain小鼠子宮頸上皮細胞提取物
Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)枯草芽胞桿 1,4-二(基硅烷基)苯球蛋白A

 人造沸石球蛋白G

乳桿屬 N,N-二甲基-N-(3-磺基)-1-十八烷內(nèi)鹽球蛋白M

淺綠黃假單胞 氧化鈦(IV)藍舌病

疣梗青霉 氧化鈦(IV)南非口蹄疫病1型

釀酒酵母 2-(三氟甲基)吡啶-3-甲南非口蹄疫病2型

鏈霉屬 線狀氧化銅南非口蹄疫病3型

馬腺疫鏈球獸疫亞種 硫化亞鐵表皮生長因子

矩圓黑盤孢 四氧化三錳神經(jīng)生長因子

釀酒酵母 鄰苯二甲單丁酯前列腺E2

海洋桿 叔丁基二茂鐵前列腺E1

蔥色串孢 (R)-(-)-4-芐基-3-酰-2-惡唑烷酮前列腺F2

釀酒酵母 Chloro[(R)-(+)-2,2'-bis(di-p-tolylphosphino)-1,1'-前列腺F1

單核增生科斯特氏 2-羥基吡啶-N-氧化物前列腺

柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇) 碲化鋅半乳糖凝集

 


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