一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。

5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。

6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。

7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。

8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)：高地病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：Highlands J VirusJRTPCR

貨號(hào):BJ-P6848

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:

特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

25g 甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷 Methylα-D-Mannopyarnoside 室溫干燥保存馬鈴薯瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Potato Agar250克霉菌、酵母菌的培養(yǎng)、鑒定

0.1mL×10 Rosetta (DE3) pLysS 感受態(tài) Rosetta (DE3) pLysS Competent Cell -80℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Neutrophil defensin 1

2 ug pcDNA4/HisMax B pcDNA4/HisMax B 低溫運(yùn)輸，-20℃保存TAT肉湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)TAT Broth用于化妝品和微生物檢測(cè)(Acumedia方法)250

250mg 蛋白 E Pronase E 4℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human TBC1 domain family member 1

雙歧桿菌瓊脂培養(yǎng)基 Bifidobacterium BS Medium 250g 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Progesterone

5g 4- 氯 -1- 萘 4-Chloro-1-Naphthol（4-CN） -20℃保存

0.5mL dATP溶液，100mM dATP Solution -20℃保存 7.8-500 ng/mL 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒

1mL 胚胎裂解液 Embryonic Cell Lysis Solution 4℃保存

牛心浸粉 Beef Heart Infusion 100g 0.78-50 ng/mL 人PORCN蛋白(PORCN)ELISA試劑盒

1瓶 BE(2)-M17株 BE(2)-M17 低溫運(yùn)輸和保存

1瓶 SK-N-BE(2)株 SK-N-BE(2) 低溫運(yùn)輸和保存

高地病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒線粒體超氧化物染色試劑盒-M13  30T|50T

  內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒(藍(lán)色熒光)  125T|250T

  高爾基體G01綠色熒光染色試劑盒  30T

  溶酶體染色試劑盒(綠色熒光)-L01  250T|500T

  溶酶體染色試劑盒(紅色熒光)-L03  500T|1000T

  溶酶體染色試劑盒(黃色/藍(lán)色熒光)-L05  125T|250T

  細(xì)胞質(zhì)染色試劑盒-C01  500T

  Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)  50T|100T

  細(xì)胞膜染色試劑盒(綠色熒光)-M01  1000T|5000T

  細(xì)胞膜染色試劑盒(橙色熒光)-M03  1000T|5000T

  細(xì)胞骨架染色試劑盒-C12  500T