使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）     轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

公司產品具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品名稱：OTTOⅠ解離液說明書

貨號：BJ-01R3424

規(guī)格：100ml

分類：細胞組分分離

儲存條件：4℃,12個月

用途：分離植物組織細胞核

注意事項：主要由檸檬酸、吐溫等組成。

注意事項：

1、盡注意無菌操作，避免污染。

2、避免反復凍融。

3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

標準溶液的配制：

1.直接配制法    對于純凈的物質(稱做基準物質)可準確進行稱量，用蒸餾水溶解后，轉移到一定容積的容量瓶中稀釋至標線，溶液的準確濃度可以直接計算出來。溶質的純度、性質等對濃度有較大影響，為此，對用來直接配制標準溶液用的基準物質必須具備以下條件：

(1)物質的純度要高，含量不得低于99.9％，雜質的含量應當少到可以忽略的程度。

(2)物質的分子組成應與其化學式*符合，包括結水合物中的結品水含量也必須與其化學式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性質穩(wěn)定，貯蔵時應不發(fā)生變化，不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分，不易風化潮解和被空氣氧化，烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準物質以減小稱量誤差。

2.間接配制法    凡不符合基準物質條件的物質，可先配制成近似所需濃度的溶液，再用基準物質溶液或能與其發(fā)生定量反應的標準溶液進行滴定，求其準確濃度，這種通過滴定來確定準確濃度的操作叫做“標定"。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制，可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質轉移到干凈的試劑瓶中，先加少量蒸餾水將其溶解，繼續(xù)用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數(shù)試劑不符合基準物的條件，故間接法配制標準溶液是經常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質；濃鹽酸因易揮發(fā)而無法準確稱量；不易得到分析純級的試劑等，這些物質的標準溶液須用間接法來配制，經標定后再做標準溶液使用。

標準溶液的標定：

1.用基準物質標定法

(1)多次稱量法    用減重法精密稱取幾份(如2～3份)基準物質，分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內，各加少量蒸餾水溶解，再加指示劑后分別用待標定溶液滴定至等當點，各自記錄所消耗待標定溶液的體積，結合基準物質的重量分別算出溶液的準確濃度，最后取平均值做為標準溶液的濃度。

(2)移液管法    精密稱取一份基準物質，在干凈的小燒杯內加少量蒸餾水溶解，順玻棒全部轉移到已校正好的容量瓶中，多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中，最后配成一定體積的溶液，混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉移至錐形瓶中，加指示劑后用待標定溶液滴定至等當點，每次做好記錄，根據(jù)所消耗待標定溶液的體積，結合基準物質的重量，分別算出溶液的準確濃度取平均值做為標準溶液的濃度。

2.比較法標定    如果待標定溶液能與某標準溶液進行反應，可吸量一定體積的某標準溶液，用待標定溶液滴定，或吸量一定體積的待標定溶液，用某標準溶液滴定。根據(jù)兩溶液所消耗的毫升數(shù)及某標準溶液的濃度，按N1V1＝N2V2式可以計算出待標定溶液的準確濃度。這種用標準落液來測定待標定溶液準確濃度的過程稱為“比較法"標定。如果某標準溶液的濃度由于某些原因不夠準確時，就會直接影響待標定溶液濃度的準確性，顯然比較法不如用基準物質直接標定的方法精確，但比較法簡便易行。

標定完畢，蓋緊標準溶液試劑瓶塞，瓶簽上注明標準溶液名稱、準確濃度和日期等。

Radix trichosanthis天花粉LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周METTL11A  甲基化樣蛋白11抗體（N端） 規(guī)格: 0.1mlDuck salmonella  鴨沙門氏菌抗體 0.2ml

火雞源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1mlCD5  CD5抗體 規(guī)格: 0.1ml

Moraxella bovoculi牛眼莫拉氏探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-Alpha synuclein(Tyr133)  磷酸化核突觸蛋白α抗體 規(guī)格: 0.1mlCK II Alpha/STK  絲/蘇蛋白質激抗體Casein kinase Ⅱα(CKⅡα) 規(guī)格: 0.1ml

Inonotus weirii松干基褐腐病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周KCNC4/KV3.4  離子通道蛋白Kv3.4抗體 規(guī)格: 0.2mlCWH43  細胞壁合成蛋白43抗體 規(guī)格: 0.2ml

Karolinska Institute Polyomavirus（KAPyV）KI多瘤病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HIPK3  Fas相互作用蛋白激3抗體 規(guī)格: 0.2mlIRS-3  胰島素受體底物-3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Monkey Pox Virus(MPV)猴痘病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周GRB10  生因子受體結合蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Guinea pig IgG/RBITC  羅丹明標記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

Mycocentrospora acerina香菜腐爛病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HRH1  組胺受體H1抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-FADD(Ser191)  磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

麻疹/風疹雙重探針法熒光定量PCR試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周GAPDH   3-磷酸甘油醛脫抗體(內參抗體) 0.1mlPhospho-PDGFRA(Tyr849)/PDGFRB(Tyr857)  磷酸化小板源性生因子受體α/β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Spiroplasma citri柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 -20℃ 一年 2-4周pan methyl Lysine  泛甲基賴抗體 規(guī)格: 0.2mlAurora C  有絲分裂激B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Radix rehmanniae preparata熟地黃染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlphospho-c-kit(Tyr936)  磷酸化原基因c-kit抗體 規(guī)格: 0.1ml

OTTOⅠ解離液說明書人去唾液酸糖蛋白受體1(ASGR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ASGR1 (Asialoglycoprotein Receptor 1) ELISA Kit

人酸性神經鞘磷脂(ASM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ASM (Acid Sphingomyelinase) ELISA Kit

人絲裂原活化蛋白激14(MAPK14)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit

人無孢蛋白(ASPN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ASPN (Asporin) ELISA Kit

人天氨基轉移(AST)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human AST (Aspartate Aminotransferase) ELISA Kit

人血管緊張肽A(ATA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ATA (Angiotensinase A) ELISA Kit

人毛細血管擴張性共濟失調突變因子(ATM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ATM (Ataxia Telangiectasia Mutated) ELISA Kit

人失調癥蛋白1(ATXN1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ATXN1 (Ataxin 1) ELISA Kit

人轉錄激活因子1(ATF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ATF1 (Activating Transcription Factor 1) ELISA Kit

人轉錄激活因子2(ATF2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ATF2 (Activating Transcription Factor 2) ELISA Kit

人轉錄激活因子3(ATF3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ATF3 (Activating Transcription Factor 3) ELISA Kit

人轉錄激活因子4(ATF4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ATF4 (Activating Transcription Factor 4) ELISA Kit

人轉錄激活因子6(ATF6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ATF6 (Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit

人腺苷三磷酸結合盒轉運體G1(ABCG1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ABCG1 (ATP Binding Cassette Transporter G1) ELISA Kit