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規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse coagulation factor IX (F IX) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9927 |
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備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
CM-R123大鼠角膜成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL羅漢果黃素質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Grosvenorine
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞白皮杉醇,3'-羥基白藜蘆醇;比杉特醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品Piceatannol
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0908 人破骨細胞*培養(yǎng)基 100mL氯化鎂質(zhì)量規(guī)格:工業(yè)級Magnesium chloride
新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE苜蓿素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Tricin
FUCA1 Others Human 人 FUCA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 羅氟司特-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口Roflumilast-d3
SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) N-β-酰-L-組酸,英文名或英文縮寫:L-Carnosine,級別:BR,99%,規(guī)格:5克
人骨骼肌衛(wèi)星細胞cDNAHSkMSC cDNA3-薄荷氧基-1,2-炳二醇 3-[[5-Mqthyl-2-(1-mqthylqthyl)cyclohqxyl]oxy]propcnq-1,2-diol 87061-04-9
IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細胞裂解液 (陽性對照) TRISTRICINESDS10XLIQUIDCONCENTRATETris-Tricine-SDS緩沖液超級透明無色液體RTsigma
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8N-甲基基乙酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium Sarcosine,級別:BR,98%,規(guī)格:25克
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5 胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液) 10mL1999-8-13-硝基;間硝基;間硝基3-nitnotolue;metxyl-M-nitnobenzol;M-Ni-trotoluol
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 標簽)4-叔丁基本酸shēng huà shì jì容量:1克
NEC(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 22RV1(前列腺癌細胞)鄰酞絡(luò)合劑 o-Cresolphthalein complexon 2411-89-4 25G 通用試劑
CL-0403NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2LC242 HCM-002 187282-64-4
ACBD6 Others Human 人 ACBD6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-LysineacetatesaltL-醋酸賴酸1克BR,98.5%
人臍靜脈內(nèi)皮細胞總RNAHUVEC NA1317-33-5二硫化鉬MOLYBDENUM(IV) SULFIDE
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)elisa進口試劑盒IFNA5 Others Mouse 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲羥孕酮-d3Medroxyprogesterone-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
牦牛皮膚細胞;BMU-S1甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸Methimazole Thio-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
大鼠癌細胞;MADB106 胃腺癌細胞,AGS細胞 SDBMSC細胞,SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞美洛西林Mezlocillin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 Human二去甲基米非司酮Didemethyl Mifepristone質(zhì)量規(guī)格:美國進口
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) 22-羥基米非司酮22-Hydroxy Mifepristone質(zhì)量規(guī)格:美國進口
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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