當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>elisa進(jìn)口試劑盒>>大鼠elisa進(jìn)口試劑盒>> 48T/96T大鼠維生素B12(VB12)elisa進(jìn)口試劑盒
大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)elisa進(jìn)口試劑盒
大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)elisa進(jìn)口試劑盒
大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)elisa進(jìn)口試劑盒
大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)elisa進(jìn)口試劑盒
我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測,全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn),索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
產(chǎn)品名稱 | 大鼠維生素B12(VB12)elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱 | Rat vitamin B12 (VB12) ELISA Kit |
貨號(hào) | BJ-G9755 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Hs68(人男性正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸氨溴索(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Ambroxol HCl
4T1(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H067人腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人心肝成纖維細(xì)胞RNAHCF miRNA5 μg氨1汀(三水)質(zhì)量規(guī)格:干品Purity≥98.0%Amifostine
CM-R071大鼠輸尿管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLG2(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAflatoxin G2
XCL1 Others Canine 狗 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 茜素黃R鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:Ind GradeAlizarin yellow R , salt
大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓RMSCD-阿洛糖(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRALL, D-Allose
人Butt瘤細(xì)胞;RAJI 大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27(6-27),人,雞,小鼠,豬,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)
胃癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(16-38),人,雞,小鼠,綿羊,豬,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)
IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關(guān)肽(1-29),大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPACAP-Related Peptide (1-29)(rat)
大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL胰多肽,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPancreatic Polypeptide,human
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞 Alveolar macrophages of NR8383 rats F12K培養(yǎng)基(SIGMA)+20%FBS川續(xù)斷皂苷乙(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dipsacoside B
小氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基SAEpiCM-prf霉菌培養(yǎng)基25克
Hela P10s-11F細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞之融合細(xì)胞,NG108-15細(xì)胞 支氣管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)凝膠多糖 Curdlan 54724-00-4 1G 通用試劑
HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2三錄化銦 Indium chloridq 1002-8-8
hPC-PL Pellet 人胎盤周細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人前列腺平滑肌細(xì)胞總RNAHPSMC NA現(xiàn)隱肉湯100毫升
CM-M066小鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL599-00-8氘代三-d1tnifluonoeeti ei7-D
大鼠維生素B12(VB12)elisa進(jìn)口試劑盒BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317氯羥喹(標(biāo)準(zhǔn)品)Clioquinol質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定
人心臟成纖維細(xì)胞HCF硫酸沙丁胺醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Albuterol sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸普拉鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Dehydroepiandrosterone-3-sulfate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL撲米酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Primidone質(zhì)量規(guī)格:檢查
SUP-B15人Ph+急淋白血病細(xì)胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS葡萄糖酸鋅(標(biāo)準(zhǔn)品)Zinc gluconate質(zhì)量規(guī)格:檢查
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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