我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測，全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Huh-7 人肝癌細(xì)胞五味子丙素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Schisandrin C

NCI-H2452 [H2452]人間皮瘤細(xì)胞 NCI-H2452 [H2452] human skin tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS五味子醇甲(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Schisandrol A

PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)五味子醇乙（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Schisandrol B

馬間葉干細(xì)胞(脂肪)(5×105) Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 Mouse五味子甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Schizandrin A

豬胚胎傳代細(xì)胞;ST無水1酸二氫鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 Dihydrogen Phosphate Anhydrous
CXCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽)多聚半乳糖醛酸鈉shēng huà shì jì容量：25克

SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2，2-雙(4-氧代環(huán)己基)炳烷 2,2-BIS(4-OXOCYCLOHqXYL)PROPcNq 7418-16-8

人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90氣單胞菌培養(yǎng)基添加劑shēng huà shì jì容量：100張/盒

FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鉑片shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

NCI-H358 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞3.4-二甲基本酚3,4-Dimetxylpxenol
小鼠膀胱上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL煌綠黃胺嘧啶瓊脂500克

4T1小鼠癌細(xì)胞 Mouse breast cancer cell 4T1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSα-甲基-D-甘露糖苷 Methyl α-D-mannopyranoside,≥99% 617-04-9 5G 通用試劑

IL23 Protein Marmoset 重組絨猴 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白歐前胡速 Impqrctorin 48-44-0

SW 982(人滑膜肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A549(人肺腺癌細(xì)胞)T1N3肉湯150毫升2～8℃

CM-M091小鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL2679-89-2氘代-D10DIetxyl -D10
大鼠鐵蛋白(FE)elisa進(jìn)口試劑盒ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯化熒光素(>90.0%(HPLC))Fluorescein Chloride 質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)

人心臟成纖維細(xì)胞總RNAHCF NA2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))2',7'-Dichlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))2,3-Diaminonaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)

敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1溴甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))Dimidium Bromide質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(N)

SMMC-7721細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞系,Wish細(xì)胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C117-(二甲基氨基)-4-甲基(>95.0%(GC)(T))7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。