我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費代測，全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導(dǎo)，免費代做實驗，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點：靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
H322人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 H322 cells in human non small cell lung cancer DMEM+10% FBS雷公藤定堿質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Wtlfordine

OSM Protein Human 重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)三正丁基十四烷基氯化膦質(zhì)量規(guī)格：50%gradeTributyltetradecylphosphonium chloride

RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHRF(人巨核細(xì)胞白血病)羅漢果皂苷ⅢA1質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品mogroside ⅢA1

CL-0092HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2羅漢果皂苷ⅡA2質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品mogroside II A2

CLEC14A Others Rat 大鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Telocinobufagin
KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2HC瓊脂基礎(chǔ)25毫升

Promocell C-25210 Hepatocyte Basal Medium , 肝細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500ml炳1酰安-D3 cCRYLcMIDq-2,3,3-D3 1772-19-3

人前列腺平滑肌細(xì)胞裂解物HPSMCL鳥嘌呤 Guanine (≥99%, SigmaUltra) 73-40-5 1G 核酸衍生物

DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TG-SDS,10XLIQUIDCONCENTRATETG-SDS緩沖液,10X濃縮液超級透明無色液體RTsigma

BHK-21 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞(去離子價酰按)
IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-色酸10克RT

人成纖維細(xì)胞HLF甘膽酸鈉鹽  glycocholate hydrate,98% 338950-81-5 250MG 通用試劑

HFF細(xì)胞，小兒細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,SH2細(xì)胞 星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-6 95 atom % 6Li litxium-6 1428-7-1

MCF 7B(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2FMOC-L-亮酸1公斤

Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R059大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET50-78-2阿司匹林Aspirin
小鼠補體因子H(CFH)elisa進(jìn)口試劑盒艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich鄰菲啰啉鹽酸鹽，一水1,10-Phenanthroline  monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膦酰二肽鈉Phosphoramidon di salt質(zhì)量規(guī)格：0.99

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷Decyl β-D-glucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EPO Others Rat 大鼠 Erythropoietin / EPO 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 德羅特韋(GSK-1349572,DTG)Dolutegravir,GSK1349572質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂?；咸烟?/span>Dodecyl glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。