T7 Endonuclease I

商品屬性：

商品介紹：

T7 核酸內(nèi)切酶 I 識(shí)別并切割不配對(duì) DNA、十字型結(jié)構(gòu) DNA、Holliday 結(jié)構(gòu)或交叉 DNA、異源雙鏈 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈 DNA。該酶切割錯(cuò)配堿基 5′ 端的第一、第二或第三個(gè)磷酸二酯。
本產(chǎn)品是通過克隆重組表達(dá) T7 核酸內(nèi)切酶 I 基因，獲得的高純度蛋白，該酶無其他內(nèi)切酶或外切酶污染。

活性定義：在 50 μl 反應(yīng)體系，37℃ 條件下，1 小時(shí)將90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型結(jié)構(gòu)的 pUC（AT）* 轉(zhuǎn)化成 90% 以上的線性結(jié)構(gòu)所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。
應(yīng)用：
基因突變、SNP、TALEN 或 CRISPR/Cas9 形成的突變體檢測(cè)識(shí)別錯(cuò)配 DNA分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA檢測(cè)或切割異源二聚體 DNA 和切刻 DNA隨機(jī)切割線性 DNA 進(jìn)行 shot-gun 克隆：
50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2 ，1 mMDTT（pH 7.9 @ 25℃）
酶儲(chǔ)存液：50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。
儲(chǔ)存：置于-20°C 可保存 2 年，避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
(1) T7 核酸內(nèi)切酶 I 是一種具有底物結(jié)構(gòu)選擇性的酶；該酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物，必須控制酶量和反應(yīng)時(shí)間。
(2)反應(yīng)溫度超過 42℃時(shí)，會(huì)增加非特異性核酸酶活性。
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