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貨號	BJ-X96392

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產(chǎn)品名稱	Daudi (Burkitt's淋巴瘤細胞)
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號	BJ-X96392

商品屬性：

名稱 Daudi (Burkitt's淋巴瘤細胞)

別稱DAUDI; NK-10A; NK-10a; NK 10a; NK10a; GM03190; GM3190; GM17346

種屬人類

年齡（性別）男性，16歲

組織來源外周血；B淋巴母細胞；Burkitt's淋巴瘤

生長特性懸浮細胞

細胞形態(tài)淋巴母細胞樣

背景描述Daudi細胞是由E·Klein和G·Klein于1967年5月從一位16歲黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立的。Daudi細胞表面免疫球蛋白陽性(sIg+)、Β2-微球蛋白陰性，EBNA陽性，并有衣殼抗原VCA；Daudi細胞攜帶EB病毒。Daudi細胞是典型的B淋巴母細胞，廣泛應用于白血病發(fā)生機理的研究。

生物安全等級2

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~24-48小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice; forms colonies in agarose.

受體表達情況complement, expressed; Fc, expressed

注意事項該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液；請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠 COPZ1 基因全長ORF克隆

大鼠 MAP1LC3B 基因全長ORF克隆

大鼠 FBXO8 基因全長ORF克隆

大鼠 GJB1 基因全長ORF克隆

大鼠 RGD1359310 基因全長ORF克隆

大鼠 TMEM33 基因全長ORF克隆

大鼠 LAMTOR1 基因全長ORF克隆

大鼠 RAB7A 基因全長ORF克隆

大鼠 CRCP 基因全長ORF克隆

大鼠 HAAO 基因全長ORF克隆

Daudi (Burkitt's淋巴瘤細胞) 丙二酸鈉培養(yǎng)基 Malonate Broth 10 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DnaJ homolog subfamily B member 1

2 ug pBD-p53 pBD-p53 低溫運輸，-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒

30次 miRNA電泳分子量標準 miRNA Marker -20℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 16

2 ug pBAD/gIII A pBAD/gIII A 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Renin receptor

阿奇檢定培養(yǎng)基 Azithromycin Test Medium 250g 46.9-3000 ng/mL 人玻連蛋白（Vitronectin）ELISA試劑盒

2 ug pGEX-2TK pGEX-2TK 低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人谷氧還蛋白3(GLRX3)ELISA試劑盒

2 ug pKC1139 pKC1139 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人CXC趨化因子受體1(CXCR1/IL8Ra)ELISA試劑盒

2 ug pcDNA5 FRT pcDNA5 FRT 低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human NAD(P)H dehydrogenase [quinone] 1

改良HC瓊脂添加劑 1ml*5 0.312-20 ng/mL 脫氫表雄酮(Dehydroepiandrosterone)ELISA試劑盒

100U Sulfolobus DNA 聚合 IV Sulfolobus DNA Polymerase IV -20℃保存麥康凱瓊脂平板進口、國產(chǎn)MacC Agar Plate50塊大腸菌群及大腸桿菌分離

1瓶 CCC-HSF-1株 CCC-HSF-1 低溫運輸和保存

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。