我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測(cè)，全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
WI-38AV13細(xì)胞，人SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞 大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，VSMC細(xì)胞 CL-0010786-O(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫普羅寧（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Tiopronin

SP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2多索茶堿質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDoxofylline

HDBEC-c 人類皮膚血內(nèi)皮細(xì)胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)多索茶堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Doxofylline

心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl 質(zhì)量規(guī)格：>98%,Syk PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl

CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-二乙基亞硝，英文名或英文縮寫：N-nitnosodietxylamine，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：5克

人肝臟間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽  2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑

TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L(+)樹膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0

VERO細(xì)胞衍生株;SVP偶氮脒類引發(fā)劑V50shēng huà shì jì容量：2～8℃1克

CGM1細(xì)胞，EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1,8-桉樹腦Cineole
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL2核糖核酸鈉鹽(酵母)100克

FIGF Others Mouse 小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,5-吡嗪二羧醋 2,5-PYRcZINqDICcRBOXYLIC cCID DIHYDRcTq 0269-63-3

人胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL低聚果糖100克

RD細(xì)胞，人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 屎腸球菌 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich1,2-本500克

CCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)446-48-02-扶溴芐2-Fluorobenzyl bromide
人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)elisa進(jìn)口試劑盒U-937細(xì)胞，瘤細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,DU-145細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L,溶劑：5%鹽酸） Iron solution質(zhì)量規(guī)格：1000mg/L,溶劑：5%鹽酸

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（500mg/L,溶劑：1%鹽酸） Iron solution質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：1%鹽酸

ESAM Others Human 人 ESAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/mL(20°C)，基體:5%HCl） Iron Standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL(20°C)，基體:5%HCl

小鼠肝癌瘤株;H22銦標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,基體：1.0 mol/L 硝酸）Indium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體：1.0 mol/L 硝酸

CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 銦標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L(20℃)，基體：1％HCl）Indium standard質(zhì)量規(guī)格：100mg/L(20℃)，基體：1％HCl
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。