當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 2V6.11 (胚腎細胞)
貨號 | BJ-X96632 |
---|
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | BJ-X96632 |
商品屬性:
名稱 2V6.11 (胚腎細胞) 種屬人類 年齡(性別)男性,胎兒 組織來源腎;用腺病毒5(Ad5)DNA轉(zhuǎn)化;用腺病毒前區(qū)4質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述2V6.11細胞是2001年從人胚腎細胞株293 [HEK-293]衍化而來,293 [HEK-293]細胞用攜帶Zeocin-抗性標記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細胞。隨后,用包含編碼E4 24K的Ad5 E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來,載體包含SV40病毒序列。2V6.11細胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V6.11細胞誘導(dǎo)表達的人腺病毒E4 34KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測;2V6.11細胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。 生長培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 ELISA配對抗體
人 EGFR / HER1 / ErbB1 ELISA配對抗體
食蟹猴 CD16 / FCGR3 ELISA配對抗體
人 Cystatin E / CST6 ELISA配對抗體
人 BID ELISA配對抗體
人 VNN2 / Vanin-2 ELISA配對抗體
人 SULT1B1 ELISA配對抗體
人 STK4 / MST1 ELISA配對抗體
小鼠 S100A6 ELISA配對抗體
小鼠 PCSK9 ELISA配對抗體
2V6.11 (胚腎細胞) 2 ug pSilencer 5.1-U6 Retro pSilencer 5.1-U6 Retro 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人腎臟雄激素調(diào)節(jié)蛋白(ARP)ELISA試劑盒
50次 脈沖電泳Marker(低范圍PFG)
50T 星狀病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
5mL dNTP溶液,10 mM dNTP Solution,10 mM -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
125mL HEPES Lysis Buffer with Triton,2X HEPES Lysis Buffer with Triton,2X 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha
50次 FTA血片DNAout 常溫
500mL EBC- Lysis Buffer EBC- Lysis Buffer 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人朊病毒樣蛋白doppel(Prion-like protein doppel)ELISA試劑盒
硅酸鹽細菌培養(yǎng)基 Silicate Bacteria Medium 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA-binding protein Ikaros
1瓶 IR983F株 IR983F 低溫運輸和保存
50T 人黏附分子E-cad基因PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 病毒H9亞型(AIV-H9)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
50T 產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人HLA class II組織適合性抗原DRB1-15βELISA試劑盒
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。