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A7r5 (大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-05 14:32:51瀏覽次數(shù):122次

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貨號(hào) BJ-X96634
A7r5 (大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)公司*的商品:1 管 Turbo大腸桿菌 Turbo E.coli Strain -80℃保存2 ug pSG1154 pSG1154 低溫運(yùn)輸,-20℃保存50次 柱式白色念珠菌RNAout 2 ug pCL-Ampho pCL-Ampho 低溫運(yùn)輸,-20℃保存四環(huán)素檢定瓊脂 Tetracyline Examination Agar 250g

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。

產(chǎn)品名稱

A7r5 (大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

BJ-X96634

商品屬性:

名稱    A7r5 (大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)

別稱A7R5

種屬大鼠

年齡(性別)胚胎

組織來源胸大動(dòng)脈平滑肌

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

背景描述A7r5細(xì)胞培養(yǎng)到穩(wěn)定期后,表現(xiàn)出長高的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK)A7r5細(xì)胞分裂終止后合成骨肉型CPK。

生物安全等級(jí)1

生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

基因表達(dá)情況myokinase; creatine phosphokinase (muscle isoenzyme); myosin

 

圖片13.jpg 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

DOPA Decarboxylase / DDC ELISA配對(duì)抗體

Cystatin F / CST7 ELISA配對(duì)抗體

食蟹猴 CD200R ELISA配對(duì)抗體

COQ7 ELISA配對(duì)抗體

Complement Component C2 ELISA配對(duì)抗體

Contactin 5 / CNTN5 ELISA配對(duì)抗體

Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT ELISA配對(duì)抗體

ACRV1 ELISA配對(duì)抗體

SULT1E1 ELISA配對(duì)抗體

A7r5 (大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)2 ug pGC- 1 pGC- 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人角蛋白II型支架6A(K2C6A)ELISA試劑盒

10mL 超級(jí)雜交液(Oligo探針) SuperHyb Solution for Oligo -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人腎足蛋白(Nephrin)ELISA試劑盒

1g  Biotin -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人UDP-葡糖醛酸基1-6 (UDPGT 1-6)ELISA試劑盒

2 ug pTrcHis C pTrcHis C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 6.25-400 pg/mL ELISA Kit for Human Somatostatin

250mL 堿性膠電泳液,10× Alkaline Gel Buffer, 10× 常溫 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3

2 ug pTXB1 pTXB1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

80次 天凈沙單RNA擴(kuò)增試劑盒 Single Cell WTA Kit  -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人磷脂酰肌醇-4,5-二3激催化劑α(PI3Kalpha)ELISA試劑盒

1瓶 HUV-EC-C株 HUV-EC-C 低溫運(yùn)輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Phosphoribosyl pyrophosphate synthase-associated protein 1

10次 一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖?One-Tube Mutagenesis Kit -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人酯ELISA試劑盒

2 ug pSEP3 pSEP3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存北沙參亞碲酸鈉胨水培養(yǎng)基基礎(chǔ)進(jìn)口、國產(chǎn)Beisachang Sodium Tellurite Broth Base用于菌的增菌培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉0.2ml250

250mL Triton Lysis Buffer-2   Triton Lysis Buffer-2   常溫保存

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