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貨號 | BJ-X96635 |
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操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
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產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | BJ-X96635 |
商品屬性:
名稱 AML-193 (急性單核細胞白血病單核細胞) 別稱AML193 年齡(性別)女;13歲 組織來源器官:外周血; 疾?。杭毙詥魏思毎籽?; 細胞類型:單核細胞 生長特性懸浮細胞 細胞形態(tài)淋巴母細胞樣 背景描述白細胞介素3(IL-3)和粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)可協(xié)同刺激AML-193細胞生長。粒細胞集落刺激因子(G-CSF)也能支持AML-193細胞短期和長期生長,并與GM-CSF一起誘導細胞增殖;這株細胞正式命名為HTB-188。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基IMDM+5μg/ml Insulin+5μg/ml Transferrin+5ng/ml GM-CSF+5% FBS+1% P/S 推薦傳代比例3×10^5-1×10^6個/mL 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~50-60 hours 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 抗原表達情況CD15, human; Homo sapiens, expressed (75 to 95% of the cells) 基因表達情況CD15, human; Homo sapiens, expressed (75 to 95% of the cells) |
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人 EPOR ELISA配對抗體
人 Ephrin-A1 / EFNA1 ELISA配對抗體
人 CEACAM5 / CD66e ELISA配對抗體
人 CD69 ELISA配對抗體
人 OSMR / IL-31RB ELISA配對抗體
小鼠 IL6RA / CD126 ELISA配對抗體
小鼠 CD157 / BST1 ELISA配對抗體
人 HSP27 / HSPB1 ELISA配對抗體
人 SerpinF2 ELISA配對抗體
小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F
AML-193 (急性單核細胞白血病單核細胞)25g 甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷 Methylα-D-Mannopyarnoside 室溫干燥保存馬鈴薯瓊脂進口、國產(chǎn)Potato Agar250克霉菌、酵母菌的培養(yǎng)、鑒定
0.1mL×10 Rosetta (DE3) pLysS 感受態(tài) Rosetta (DE3) pLysS Competent Cell -80℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Neutrophil defensin 1
2 ug pcDNA4/HisMax B pcDNA4/HisMax B 低溫運輸,-20℃保存TAT肉湯進口、國產(chǎn)TAT Broth用于化妝品和微生物檢測(Acumedia方法)250
250mg 鏈霉蛋白 E Pronase E 4℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human TBC1 domain family member 1
雙歧桿菌瓊脂培養(yǎng)基 Bifidobacterium BS Medium 250g 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Progesterone
5g 4- 氯 -1- 萘 4-Chloro-1-Naphthol(4-CN) -20℃保存
0.5mL dATP溶液,100mM dATP Solution -20℃保存 7.8-500 ng/mL 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒
1mL 胚胎裂解液 Embryonic Cell Lysis Solution 4℃保存
牛心浸粉 Beef Heart Infusion 100g 0.78-50 ng/mL 人PORCN蛋白(PORCN)ELISA試劑盒
1瓶 BE(2)-M17株 BE(2)-M17 低溫運輸和保存
1瓶 SK-N-BE(2)株 SK-N-BE(2) 低溫運輸和保存
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