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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽

RWPE-2 (前列腺正常細胞)10g  1:10000 Pepsin 1:10000 室溫保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Phospholipase A2

50T 豬藍耳病病毒（高致病性）PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存LB營養(yǎng)瓊脂   進口、國產(chǎn)LB Nutrient Agar用于細菌培養(yǎng)250

10塊 LB平板培養(yǎng)基（無抗生素） LB Petri Dish 低溫 0.78-50 ng/mL 人腺苷脫氨樣蛋白(Adenosine deaminase-like protein)ELISA試劑盒

TSA表面接觸皿55mm  10個每包 15.6-1000 pg/mL 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2/neu/c-erbB-2)ELISA試劑盒

50次 DNA電泳分子量標準（100-5000bp） DNAMETER 4℃保存

100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   常溫保存甲基紅指示劑盒進口、國產(chǎn)用于甲基紅試驗配套試劑10ml*1

2 ug pBlueScriptR PPP2R5 B pBlueScriptR PPP2R5 B 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人受體1(FOLR1)ELISA試劑盒

BCP寒天培地（含瓊脂） BCP Medium 250gEF-18 瓊脂進口、國產(chǎn)EF-18 Agar用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)250

1g 次 Hypoxanthine 室溫保存 0.312-20 ng/mL. ELISA Kit for Human Tetraspanin-14

500mL Blotto in TBS with azide   Blotto in TBS with azide   常溫保存 3.12-200 ng/mL 人分裂周期因子42(CDC42)ELISA試劑盒

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH6.0  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH6.0  常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 11

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。