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商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠4-羥基壬烯酸(HNE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2(TRAIL-R2/DR5)免疫試劑盒*直銷

人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒*直銷

人卵泡抑素(FS)免疫試劑盒*直銷

人堿性亮拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白(BATF)免疫試劑盒*直銷

人彈性蛋白(Elastase)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

人HIV(1+2)抗原抗體免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

牛胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒*直銷

雞抗凝血Ⅲ(AT-Ⅲ)抗體免疫試劑盒*直銷

脈絡(luò)膜黑色素細(xì)胞Porcine Torque Teno Virus（PTTV）豬細(xì)環(huán)病毒LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用） 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周IL-10  白細(xì)胞介素-10抗體 規(guī)格: 0.1mlVimentin  波形蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Ostertagia ostertagi奧斯特奧斯特線蟲LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周VP2  重組豬細(xì)小毒VP2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPCNA [Proliferation Marker]  增細(xì)胞核抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

Haemophilus ducreyi杜克雷嗜血桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周beta-Amyloid(1-28)  β淀粉樣肽（1-28）抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181)  磷酸化KB抑制蛋白激α/β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Endoconcha sepiae海螵蛸染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周SAMD9  SAMD9蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Avidin/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml

Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)真鯛虹彩病毒LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-PLCG2(Tyr1217)  磷酸化磷酯Cγ2抗體 規(guī)格: 0.1mlANGEL2  ANGEL2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Equine Herpesvirus 1 (EHV-1)馬皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周KLK10  激肽釋放10抗體 規(guī)格: 0.1mlPKA/PKAcat/PKACB  蛋白激A抗體 規(guī)格: 0.1ml

Caulis spatholobi雞血藤染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周ATP6IP2  ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlARRDC2  抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Nocardia farcinica皮諾卡LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Maltose Binding Protein/MBP  麥芽糖結(jié)合蛋白抗體 0.2mlKLK5  激肽釋放5抗體 規(guī)格: 0.1ml

Transmissible Gastroenteritis Virus(TGEV)豬傳染性胃腸炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CCL5/RANTES  T細(xì)胞特異性趨化因子抗體 規(guī)格: 0.1mlNF1/Neurofibromin 1  1型神經(jīng)纖維瘤抗體 規(guī)格: 0.1ml

Dermanyssus gallinae雞皮刺螨染料法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1mlACADS  ?；oA脫短鏈抗體 0.2ml

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。