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貨號 | BJ-X96717 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96717 |
商品介紹:
名稱 NCI-H295R (腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞) 別稱NCI H295R; NCIH295R; H295R; H-295R; H295R-S1 種屬人類 年齡(性別)48歲 組織來源器官:腎上腺 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述NCI-H295R細胞是源于多能腎上腺皮質(zhì)癌細胞系NCI-H295細胞,后者由Gazdar·A·F等建立,從腎上腺皮質(zhì)的腫瘤中分離而來。NCI-H295細胞經(jīng)改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細胞,群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細胞懸浮生長,而NCI-H295R細胞呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產(chǎn)生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM/F12+ITS-G(PB180429)+10% FBS+1% P/S(PB180120) 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 基因表達情況aldosterone; cortisol; C19 steroids |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
狗 IL2RB / IL2 Receptor beta 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 IL3RA 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 KLK1 / Kallikrein 1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 PROC1
NCI-H295R (腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞) 100mL CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Renin
50T 產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 129
500 mL MEM培養(yǎng)基(含1%雙抗) Cell Culture Medium -20℃保存
250mL Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB) Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB) 常溫保存 0.156-10 ng/ml 豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
50mL Beta Glycerophosphate Solution(beta-甘油溶液),100mM Beta Glycerophosphate Solution,100mM 常溫保存
1mL EDTA溶液,0.2M EDTA Solution -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人妊娠特異性β1-糖蛋白3ELISA試劑盒
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 Rose Bengal Agar Medium 250g 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Leukemia inhibitory factor receptor
100g 七水 Magnesium Sulfate 室溫干燥保存 0.625-40 ng/mL 人Apelin(APLN)ELISA試劑盒
500U E.coli DNA聚合 Ι E.coli DNA Polymerase I -20℃保存 78-5000 pg/mL 人酸性哺乳動物殼多糖(AMCase)ELISA試劑盒
無菌水樣采集袋(含0.4mg) Water Aseptic Sampling Bag 100個/箱 0.312-20 ng/mL 人色素p450 2B6(CYP2B6)ELISA試劑盒
姬姆薩染色液 5ml*4 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pantetheinase
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