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人ELISA檢測(cè)試劑盒五個(gè)基本原理

時(shí)間:2021/7/16閱讀:335
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酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。人ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。

人ELISA檢測(cè)試劑盒基本原理如下:

1、將特定抗體(一抗)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫性。一抗是待測(cè)抗體的抗體,識(shí)別待測(cè)抗體。

2、二抗是一種與酶偶聯(lián)的抗體,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗識(shí)別并結(jié)合待測(cè)抗體。

3、測(cè)定時(shí),固定的一抗先與樣品稀釋液反應(yīng),將樣品中待測(cè)抗體固定;洗滌后再與二抗反應(yīng)。每一步之間都要進(jìn)行洗滌。

4、加入底物,酶作用底物,使之變色。底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物。

5、產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無定性或定量分析。

注意:洗滌不是反應(yīng)步驟,卻是決定成敗的關(guān)鍵。目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

 

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