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elisa檢測試劑盒的組成及試劑配制方法

時間:2021/3/31閱讀:341
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elisa檢測試劑盒技術(shù)原理:

(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。

(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。

(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。

elisa檢測試劑盒組成及試劑配制

1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。

2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。

3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

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