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樣本收集與前處理:
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
使用本試劑盒中的ATP檢測裂解液裂解獲得的細(xì)胞或組織樣品,不僅可以用于ATP檢測,還可用于檢測蛋白濃度、進(jìn)行SDS-PAGE或一些常規(guī)的較易溶解蛋白的Western檢測。
本試劑盒的使用方便快捷,通常10-20個樣品可以在30-60分鐘內(nèi)測定完畢。
本ATP檢測試劑盒的檢測靈敏度低于S0027,但高于S0026B;本試劑盒對于一些特殊樣品的兼容性低于S0026B。
ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。細(xì)胞和組織樣品一步裂解即可完成樣品制備,檢測靈敏度高達(dá)1nmol/L,化學(xué)發(fā)光可以持續(xù)穩(wěn)定達(dá)30分鐘,并且獲得的樣品還可以同時進(jìn)行Western檢測。
ATP,作為重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變,會影響細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下,ATP水平會下降,而高葡萄糖刺激等對于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降,在細(xì)胞凋亡時ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發(fā)生。
樣品制備非常簡單。本試劑盒提供了可以用于細(xì)胞和組織裂解的ATP檢測裂解液,簡單裂解后即可用于ATP檢測。無需進(jìn)行高氯酸或(TCA)抽提,或樣品裂解后的煮沸等繁瑣操作。
本試劑盒進(jìn)行了特殊的優(yōu)化設(shè)計,使檢測ATP時的化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定。對于ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測結(jié)果顯示,在開始反應(yīng)后10分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光無明顯下降,開始反應(yīng)后30分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光的下降不超過10%。
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