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深圳先進(jìn)院等設(shè)計新型“人工光細(xì)胞”構(gòu)建方法

研發(fā)快訊 2023年08月01日 09:44:17來源:深圳先進(jìn)技術(shù)研究院 14631
摘要近日,中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院合成生物學(xué)研究所高翔課題組與美國芝加哥大學(xué)田博之課題組,報道了新型“人工光細(xì)胞”構(gòu)建方法,將半導(dǎo)體材料吸收光能產(chǎn)生電子有效轉(zhuǎn)化為生物能。

  【儀表網(wǎng) 研發(fā)快訊將高效吸收光能的半導(dǎo)體材料與高選擇性催化的活細(xì)胞集成,合成新的人工體系(“人工光細(xì)胞”),利用微生物的優(yōu)異胞內(nèi)催化能力將半導(dǎo)體吸收的光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能,可潛在提高人工光合作用的效率和特異性生產(chǎn)復(fù)雜化合物的能力,為光驅(qū)生物制造技術(shù)提供新路徑。然而,半導(dǎo)體材料吸收光能產(chǎn)生的是電子,細(xì)胞利用的能量為生物能(ATP和(NADP)H),因而必須將電子轉(zhuǎn)化為生物能才能實現(xiàn)新技術(shù)路徑。由于細(xì)胞膜磷脂雙分子層絕緣性,致使半導(dǎo)體材料光生電子極難進(jìn)入細(xì)胞,與胞內(nèi)生物電子交匯并轉(zhuǎn)化為生物能的效率低。因此,如何將光生電子高效轉(zhuǎn)化為細(xì)菌可用的生物能是目前亟需解決的問題。  更多儀器儀表行業(yè)信息,可上儀表網(wǎng)獲取。  

細(xì)菌胞內(nèi)的生物電子沿著位于細(xì)胞內(nèi)膜上的氧化呼吸鏈傳遞向下游傳遞,在內(nèi)膜建立跨膜質(zhì)子梯度,從而驅(qū)動ATP合酶產(chǎn)生ATP。周質(zhì)空間是位于細(xì)菌內(nèi)外膜之間的狹窄空間,如果能將半導(dǎo)體納米顆粒定向在周質(zhì)空間內(nèi)合成,光生電子可在物理空間更接近氧化呼吸鏈,利于光生電子進(jìn)入氧化呼吸鏈并傳遞,進(jìn)而驅(qū)動ATP的合成。我們應(yīng)如何在細(xì)菌周質(zhì)空間定向合成納米材料、構(gòu)建獨(dú)特材料-細(xì)菌雜合體?

近日,中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院合成生物學(xué)研究所高翔課題組與美國芝加哥大學(xué)田博之課題組,報道了新型“人工光細(xì)胞”構(gòu)建方法,將半導(dǎo)體材料吸收光能產(chǎn)生電子有效轉(zhuǎn)化為生物能,使不能利用光能的工業(yè)發(fā)酵微生物有效利用光能。該團(tuán)隊受自然界中材料-生物界面的啟發(fā),例如厘米尺度的動物鱗片與表皮細(xì)胞,微米尺度鈣板金藻外殼材料與細(xì)胞之間,均形成具有保護(hù)功能的外殼材料??蒲腥藛T構(gòu)思了在大腸桿菌的周質(zhì)空間中定向合成CdS半導(dǎo)體材料,為其裝上納米光伏顆粒的外殼,合成新型生物界面的設(shè)計思路。

該團(tuán)隊通過在大腸桿菌周質(zhì)空間靶向合成半導(dǎo)體材料(納米光伏顆粒),將半導(dǎo)體材料吸收光能產(chǎn)生的電子高效轉(zhuǎn)化為細(xì)菌胞內(nèi)的生物能。具體來說,研究在通過大腸桿菌在胞內(nèi)利用半胱氨酸(Cys)合成H2S。因H2S具有極高的膜通透性(比水分子高3個數(shù)量級),可快速擴(kuò)散至周質(zhì)空間并與攝入到周質(zhì)空間的Cd2+反應(yīng),形成相應(yīng)的CdS納米顆粒外殼。 科研團(tuán)隊使用基于同步加速器的3D-X射線熒光光譜(3D X-ray fluorescence)和描透射電子顯微鏡 (STEM)確認(rèn)大腸菌成功合成CdS納米顆粒;制備材料-細(xì)菌雜合體的超薄切片,通過STEM分析發(fā)現(xiàn)CdS納米顆粒主要分布在周質(zhì)空間內(nèi)、大小約為29.3 nm、結(jié)晶度低;進(jìn)一步利用超聲破碎細(xì)胞、溶劑提取和分散細(xì)菌中的CdS納米顆粒,發(fā)現(xiàn)其大小僅為6 nm左右、結(jié)晶度提高,說明周質(zhì)空間原位合成納米顆??赡転槎鄠€CdS“納米團(tuán)簇“(nanoclusters)(約5個)、結(jié)晶度降低,但賦予了生物雜合體熒光特性,而熒光成像和熒光光譜表明周質(zhì)空間合成的CdS納米團(tuán)簇是亞穩(wěn)態(tài)的,主要是無序和富含缺陷的聚集體。  

為了探討CdS形成的機(jī)制,研究人員對周質(zhì)空間原位合成CdS納米團(tuán)簇的細(xì)菌進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌中與H2S合成相關(guān)的基因(cysK、dcyD、cysM、metB、metC和sufS等)、外排泵相關(guān)基因(tolC、cueO和macA等)均顯著上調(diào),表明Cd2+被細(xì)菌吸收進(jìn)入周質(zhì)空間和胞內(nèi),胞內(nèi)的Cd2+通過細(xì)菌外拍泵又被轉(zhuǎn)移至周質(zhì)空間(降低重金屬離子對細(xì)胞的毒性),而H2S具有極高的細(xì)胞膜穿透能力,快速從胞內(nèi)進(jìn)入周質(zhì)空間,與Cd2+反應(yīng)合成CdS納米顆粒。因此,CdS在大腸桿菌的周質(zhì)空間內(nèi)形成。

轉(zhuǎn)錄組顯示,在光照的條件下,周質(zhì)空間內(nèi)合成CdS的細(xì)菌雜合體與氧化呼吸鏈相關(guān)的基因(包括甲酸脫氫酶、NADH脫氫酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、丙酮酸氧化酶、d -乳酸脫氫酶和葡萄糖脫氫酶)和ATP合成酶相關(guān)基因均顯著上調(diào),表明CdS吸收光能產(chǎn)生的電子加速了細(xì)菌氧化呼吸鏈電子傳遞速率,因此可能提高ATP的合成。為了驗證這一推測,研究人員對雜合體胞內(nèi)ATP濃度進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),雜合體在光照條件下比黑暗條件下的ATP高8.1倍,并應(yīng)用于提高ATP推動的合成途徑的代謝通量。 

相關(guān)研究成果發(fā)表在《科學(xué)進(jìn)展》(Science Advances)上。研究工作得到深圳合成生物學(xué)創(chuàng)新研究院等的支持。
 

 

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