procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
Calu-1(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

TE-10細(xì)胞，人食管癌細(xì)胞 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,TG-905細(xì)胞 家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1

小鼠肉瘤瘤株;S180

PTPRC Others Human 人 CD45 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
*HBSS

IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

B95-8細(xì)胞，產(chǎn)EBV的絨猴白細(xì)胞 A549(人肺腺癌細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1

EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基PADM-prf

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYF

大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞，HEL299細(xì)胞 PT67細(xì)胞，鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞

JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 Human

LRP1 Others Human 人 LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)免疫試劑盒 human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,SGK2 ISA KIT

人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒 ，英文名： APF ELISA Kit

RatInterferonβ,IFN-β/IFNBELISA試劑盒大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanInterleukin13，IL-13ELISAKit人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠*巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒

HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

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植物細(xì)胞周期S早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

HumantrypsinELISAKit人*(trypsin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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