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北京百奧創(chuàng)新科技有限公司
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液相色譜技術(shù)2019/03/15
液相色譜法簡介液相色譜法(HPLC)是以高壓下的液體為流動相,以氣相色譜為基礎(chǔ),以顆粒極細(xì)的固定相為色譜柱,并采用高壓泵輸送流動相而建立的一種液相色譜法。液相色譜技術(shù)對樣品的適用性廣泛,不受分析對象揮發(fā)性和穩(wěn)定性的限制。因此彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足,在目前已知的有機(jī)化合物中,80%需要用色譜來分析。同時(shí)還具有;高靈敏度;應(yīng)用范圍廣;分析速度快、載液流速快的優(yōu)勢。工作流程檢測示例項(xiàng)目交付材料實(shí)驗(yàn)報(bào)告一份,內(nèi)容包括:實(shí)驗(yàn)條件,詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟,實(shí)驗(yàn)中使用的試劑和來源。結(jié)題報(bào)告一份,內(nèi)容包括:檢測結(jié)果曲線
病毒載體構(gòu)建/慢病毒包裝2019/03/15
技術(shù)簡介慢病毒(Lentivirus)載體是以HIV-1(人類免疫缺陷Ⅰ型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體,屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,慢病毒屬,基因結(jié)構(gòu)復(fù)雜,共包含9個(gè)基因,其中有3個(gè)和單純逆轉(zhuǎn)錄病毒相似結(jié)構(gòu)的基因:gag、pol、env;4個(gè)輔助基因:vif、vpr、nef、vpu和2個(gè)調(diào)節(jié)基因:tat和rev。該病毒能夠?qū)谢驅(qū)氲揭恍┹^難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞等,并且將靶基因隨機(jī)整合到宿主的基因組中,可作為一種體外運(yùn)輸工具,從而大大增加了轉(zhuǎn)染率,同時(shí)具有感染分裂期和非分裂期細(xì)胞、容納外源性基因
RNA干擾(基因沉默)2019/03/15
項(xiàng)目內(nèi)容概述RNA干擾(RNAi,RNAInterference)是抵御外來病毒侵犯的一種防御機(jī)制,廣泛應(yīng)用于功能基因組學(xué)、基因治療、靶藥物篩選、細(xì)胞信號通路分析、蛋白質(zhì)互作等領(lǐng)域。具體來說,當(dāng)dsRNA或pre-miRNA進(jìn)入細(xì)胞后,能夠被特異的核酸內(nèi)切酶(Dicer)識別并切割成為很小的片段,這些片段在解旋酶的作用下會解鏈。反義鏈在與體內(nèi)一些酶結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RNA-InducedSilencingComplex,RISC),RISC與mRNA同源區(qū)進(jìn)行特異性結(jié)合,若miRN
SNaPshot法基因分型介紹2019/03/14
SNaPshot基因分型技術(shù)是由美國ABI公司開發(fā)的一種基于熒光標(biāo)記單堿基延伸鏈終止反應(yīng)原理的分型技術(shù),主要針對中小通量的SNP分型項(xiàng)目。簡單說來,在一個(gè)含有測序酶、四種熒光標(biāo)記ddNTP、緊臨SNP位點(diǎn)5’-端的不同長度延伸引物和模板DNA的反應(yīng)體系中,引物延伸一個(gè)堿基即終止,經(jīng)ABI3730XL測序儀檢測后,根據(jù)峰的位置確定該延伸產(chǎn)物對應(yīng)的SNP位點(diǎn),而根據(jù)峰的顏色可得知摻入的堿基種類,從而確定該樣本的基因型。同時(shí),通過多重PCR反應(yīng)體系,可以同時(shí)檢測多種SNP位點(diǎn),通??梢杂糜?0-35個(gè)
MASS ARRAY 基因分型2019/03/14
質(zhì)譜法基因分型技術(shù)簡介DNA質(zhì)譜陣列基因分析系統(tǒng)以其通量高、自動化、靈活、結(jié)果準(zhǔn)確、實(shí)驗(yàn)成本低廉等諸多優(yōu)勢成為了大學(xué)、醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所、生物技術(shù)公司、制藥企業(yè)、疾控中心等機(jī)構(gòu)所推崇的研究工具。應(yīng)用領(lǐng)域涵蓋醫(yī)學(xué)及轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)、基因組學(xué)、表觀遺傳學(xué)、農(nóng)業(yè)遺傳育種及轉(zhuǎn)基因技術(shù)等相關(guān)領(lǐng)域。檢測儀器信息SequenomMassArray時(shí)間飛行質(zhì)譜生物芯片系統(tǒng)是為基因組學(xué)研究提供兼顧靈敏度和特異xing服務(wù)的中高通量技術(shù)平臺,廣泛地應(yīng)用于遺傳突變檢測、SNP分型以及DNA甲基化定量分析研究,是目前
KASP基因分型2019/03/14
KASP基因分型介紹KASP(KompetitiveAllele-SpecificPCR),即競爭性等位基因特異性PCR,原理上與TaqMan檢測法類似,都是基于終端熒光信號的讀取判斷,每孔反應(yīng)都是采用雙色熒光檢測一個(gè)SNP位點(diǎn)的兩種基因型,不同的SNP對應(yīng)著不同的熒光信號。KASP技術(shù)與TaqMan法類似,它與TaqMan技術(shù)不同的是,它不需要每個(gè)SNP位點(diǎn)都合成特異的熒光引物,它基于*的ARMPCR原理,所有的位點(diǎn)檢測終都可以使用通用熒光引物進(jìn)行擴(kuò)增,這降低了KASP技術(shù)的試劑成本,既有準(zhǔn)確
酵母雙雜交文庫構(gòu)建技術(shù)服務(wù)2019/03/14
酵母雙雜交文庫構(gòu)建技術(shù)服務(wù)介紹酵母雙雜交技術(shù)產(chǎn)生以來,主要應(yīng)用在以下幾個(gè)方向:1、檢驗(yàn)一對功能已知蛋白間的相互作用。2、研究一對蛋白間發(fā)生相互作用所必需的結(jié)構(gòu)域。3、用已知功能的蛋白基因篩選雙雜交cDNA文庫,以研究蛋白質(zhì)之間相互作用的傳遞途徑。4、分析新基因的生物學(xué)功能,即以功能未知的新基因去篩選文庫。通常依靠報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄激活來鑒定蛋白相互作用。將一個(gè)基因克隆到"誘餌"載體,并和GAL4蛋白的DNA結(jié)合域(DBD)表達(dá)為融合蛋白。將第二個(gè)基因或者編碼可能的相互作用子蛋白的cDNA文庫克隆到"
捕獲探針試劑盒定制2019/03/14
探針捕獲測序是常用的目標(biāo)區(qū)域基因檢測方案,該方案基于多因素算法對目標(biāo)區(qū)域基因組進(jìn)行設(shè)計(jì),然后合成出有效的特異性探針,進(jìn)而與基因組DNA進(jìn)行雜交,將目標(biāo)區(qū)域序列進(jìn)行捕獲并富集后,使用主流的illumina測序平臺進(jìn)行高通量測序。通過對大量樣本的目標(biāo)區(qū)域研究,有助于發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證疾病相關(guān)的目標(biāo)基因和關(guān)鍵位點(diǎn),在臨床診斷和藥物開發(fā)方面有著巨大的應(yīng)用空間,同時(shí)在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域相關(guān)研究中也有巨大的應(yīng)用潛力。液相捕獲操作簡單,對儀器設(shè)備要求低,可在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)完成目標(biāo)序列富集和測序文庫構(gòu)建,特別適用于臨床檢測。固相捕獲
真核mRNA測序2019/03/13
真核mRNA測序分析的研究對象為特定細(xì)胞在某一功能狀態(tài)下所能轉(zhuǎn)錄出來的所有mRNA的總和。轉(zhuǎn)錄組研究是基因功能及結(jié)構(gòu)研究的基礎(chǔ)和出發(fā)點(diǎn),通過新一代高通量測序,能夠全面快速地獲得某一物種特定組織或器官在某一狀態(tài)下的幾乎所有轉(zhuǎn)錄本序列信息。產(chǎn)品分類有參轉(zhuǎn)錄組測序:對有參考序列的物種利用雙端測序技術(shù)對mRNA進(jìn)行測序,通過與參考序列進(jìn)行比對,統(tǒng)計(jì)基因的表達(dá)量,并進(jìn)行差異分析和功能富集分析,同時(shí)可以進(jìn)行可變剪切分析,并預(yù)測新的轉(zhuǎn)錄本。無參轉(zhuǎn)錄組測序:對沒有參考序列的物種利用雙端測序技術(shù)對mRNA進(jìn)行測序
細(xì)菌基因組測序2019/03/13
產(chǎn)品介紹細(xì)菌基因組測序,可分為細(xì)菌基因組denovo測序和細(xì)菌基因組重測序兩類。細(xì)菌基因組denovo測序,即從頭測序是指不需要任何現(xiàn)有的序列信息就可以對某個(gè)細(xì)菌物種進(jìn)行測序,利用生物信息學(xué)分析手段對序列進(jìn)行拼裝,從而獲得該細(xì)菌物種的基因組序列。細(xì)菌基因組重測序是對已有參考序列(ReferenceSequence)的物種的不同個(gè)體進(jìn)行基因組測序,并以此為基礎(chǔ)進(jìn)行個(gè)體或群體水平的差異性分析??申P(guān)注大量的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SNP)、插入缺失(InDel,Insertion/Deletion)、結(jié)構(gòu)
目標(biāo)區(qū)域高通量測序服務(wù)2019/03/11
目標(biāo)區(qū)域高通量測序介紹目標(biāo)區(qū)域高通量測序是一種高度特異和靶向的方法,是指采用各種技術(shù)手段將待檢測的目標(biāo)區(qū)域富集之后,進(jìn)行高通量測序的研究策略。目標(biāo)區(qū)域的高深度測序可以有效識別基因的變異并對其進(jìn)行特征譜分析,通常用于分析特定基因組區(qū)域中的DNA變異,尤其是腫瘤的基因組研究。目標(biāo)區(qū)域高通量測序的策略與區(qū)別液相雜交捕獲擴(kuò)增子測序富集策略探針雜交多重PCR適用范圍100k目標(biāo)區(qū)域目標(biāo)區(qū)域檢測變異類型SNP、大片段Indels、融合基因、基因擴(kuò)增等。SNP、小片段Indels、基因擴(kuò)增等核酸起始量100-
宏基因組測序服務(wù)2019/03/11
宏基因組測序介紹宏基因組測序(MetagenomicsSequencing)是對檢測樣品中全部微生物的總DNA(即宏基因組,Metagenome)進(jìn)行提取純化,隨機(jī)打斷,建庫并進(jìn)行高通量測序,后通過組裝將小片段拼接成較長的序列。宏基因組測序主要研究微生物種群的結(jié)構(gòu)、基因功能、微生物之間的相互協(xié)作關(guān)系、微生物與環(huán)境之間的相互關(guān)系等等。由于宏基因組測序不受微生物分離和培養(yǎng)的限制,大大擴(kuò)展了微生物資源的利用度和便利性,為環(huán)境微生物群落的科學(xué)研究提供了的工具。宏基因組的深度測序可以揭示環(huán)境中真實(shí)的物種多
單細(xì)胞測序技術(shù)服務(wù)2019/03/11
單細(xì)胞測序介紹單細(xì)胞測序技術(shù)(scWGS)是在單細(xì)胞水平對基因組進(jìn)行擴(kuò)增與測序,進(jìn)行差異性分析的一項(xiàng)新技術(shù)。其原理是將分離的單個(gè)細(xì)胞的微量基因組DNA進(jìn)行復(fù)雜的線性擴(kuò)增,由于具有低偏倚性特點(diǎn),擴(kuò)增更均勻,因而更能準(zhǔn)確精細(xì)地判定細(xì)胞是否存在變異。在獲得高覆蓋率的完整的基因組后,進(jìn)行高通量測序,可用于揭示細(xì)胞群體差異和細(xì)胞進(jìn)化關(guān)系,在微生物生態(tài)學(xué)、癌癥基因組、法醫(yī)學(xué)、微量診斷、遺傳印記等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。單細(xì)胞測序技術(shù)能夠讓醫(yī)生和研究人員分離、選擇并擴(kuò)增單個(gè)細(xì)胞的基因組、轉(zhuǎn)錄組、表觀組,能夠更清楚深入
HLA分型技術(shù)服務(wù)2019/03/11
簡介HLA(Humanlymphocyteantigen,人類白細(xì)胞抗原,也成主要組織相容性抗原,MHC)位于6號染色體短臂上,長約4000kb,由一群緊密連鎖的基因組成,是目前已知的多態(tài)性zui高的抗原系統(tǒng),化學(xué)本質(zhì)為一類糖蛋白,由一條α—重鏈(被糖基化的)和一條β輕鏈非共價(jià)結(jié)合而成,肽鏈的氨基端向外,羧基端穿入細(xì)胞質(zhì)中,中間疏水部分在胞膜。HLA研究涉及免疫學(xué)、生物學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等多個(gè)學(xué)科,并已經(jīng)發(fā)展成為一個(gè)獨(dú)立的學(xué)科。HLA分型基于二代測序進(jìn)行,通過對所要分析的HLA基因片段
16S/18S/ITS微生物測序服務(wù)2019/03/11
產(chǎn)品介紹微生物群落多樣性分析是指利用二代高通量測序技術(shù),對微生物的16SrDNA、18SrDNA以及ITS高變區(qū)域,或者功能基因進(jìn)行測序,分析環(huán)境中細(xì)菌、古細(xì)菌以及真菌的種類組成和含量,揭示環(huán)境樣品中微生物種類以及它們之間的相對豐度和進(jìn)化關(guān)系,進(jìn)一步探討微生物多樣性;對于研究微生物與人類醫(yī)療健康、食品安全、環(huán)境檢測與治理、微生物資源的利用等有著重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。產(chǎn)品分類16SrDNA測序:16SrDNA為編碼原核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列,存在于所有細(xì)菌染色體基因中,共包括9個(gè)可變
雙特異性抗體在腫瘤之外的奇葩應(yīng)用2018/09/21
隨著越來越多的人開始關(guān)注雙特異性抗體,目前有超過100家公司或者科研單位在進(jìn)行雙特異性抗體研究,有60多個(gè)候選藥物進(jìn)入不同的臨床階段。在抗體藥物研發(fā)中,目前雙特異性抗體已經(jīng)占到約20%,較5年前的10%翻了一番。這其中大概有68%的候選藥物集中在腫瘤領(lǐng)域,其中又有50%的腫瘤領(lǐng)域藥物有一個(gè)共同的靶分子--CD3。目前已經(jīng)上市兩種產(chǎn)品,分別是2009年上市的Catumaxomab和2014年上市的Blinatumomab。作為者,二者的市場表現(xiàn)并沒有太多亮眼之處。這可能也和二者的"先天不足"有關(guān),
全HEK293細(xì)胞系匯總2018/09/21
*,哺乳動物細(xì)胞作為蛋白的表達(dá)系統(tǒng)具有糖基化、乙?;⒘蛩峄?、硫酸化等翻譯后修飾。而蛋白翻譯后修飾,如糖基化修飾,會直接影響蛋白在體內(nèi)的半衰期及穩(wěn)定性和生物學(xué)活性、影響配體識別及結(jié)合,影響其免疫原性,影響胞間作用等等功能。目前,哺乳動物細(xì)胞已被廣泛用于重組蛋白、疫苗、抗癌試劑及其他臨床相關(guān)的藥物的生產(chǎn)中。CHO細(xì)胞、BHK細(xì)胞、Sp2/0等細(xì)胞常被用于制備生物制藥。然而這些小鼠來源的細(xì)胞與HEK293細(xì)胞相比,缺乏人的細(xì)胞翻譯后修飾系統(tǒng),因此與人源系統(tǒng)表達(dá)的蛋白有差異。目前,HEK293細(xì)胞被廣
細(xì)胞培養(yǎng)的成功因素---細(xì)胞消化篇2018/09/20
許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,一起討論:1,其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)
ELISA的技術(shù)要點(diǎn)2018/09/20
ELISA的技術(shù)要點(diǎn)包括三個(gè)方面:試劑的制備、反應(yīng)條件的選擇和操作的標(biāo)準(zhǔn)化。一、試劑的制備ELISA的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物。以下敘述這些試劑的原料和制備方法。(一)固相載體可作ELISA中載體的物質(zhì)很多,常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來的免疫活性。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。在ELISA測定過程中,它作為載體和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)。加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。ELISA載體的
Nature子刊:治療高血壓的新靶點(diǎn)2018/09/07
日前,英國布里斯托大學(xué)(UniversityofBristol)和AfferentPharmaceuticals公司的研究人員聯(lián)合發(fā)現(xiàn)了一個(gè)治療高血壓的新策略。他們治療高血壓的策略不是靶向心臟或者腎臟中的常見靶點(diǎn),而是將目光轉(zhuǎn)向了位于頸部的頸動脈體(carotidbody)。他們的研究結(jié)果發(fā)表在一期的Nature子刊NatureMedicine上。高血壓是世界上導(dǎo)致死亡的zui重要因素之一。*有三分之一的人患有高血壓。對于40歲以上的成年人來說,舒張壓每上升10毫米汞柱,因心臟病致死的風(fēng)險(xiǎn)就會加
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