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ELISA技術(shù)測(cè)定單克隆抗體操作步驟詳解2019/05/08
ELISA試劑盒技術(shù)測(cè)定單克隆抗體操作步驟①抗原包被:兔抗人IgG作為抗原,用包被液l:8000稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過一夜。②洗滌:次日傾去凹孔內(nèi)的液體,洗滌液洗3次。③封閉:加l00μL/孔封閉液,室溫放置0.5h。④洗滌:用洗滌液洗3次。⑤加待測(cè)樣品(一抗):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另—塊板上用PBS連續(xù)稀釋(按照1:2或1:10),100μL/孔加到已包被的板上,每個(gè)樣品平行做兩份,PBS或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽性對(duì)照。加蓋37℃恒
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒幾點(diǎn)注意事項(xiàng)2019/04/29
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(
快接招:ELISA試劑盒化學(xué)試劑的四大稱謂,2019/04/24
ELISA試劑盒*揭秘:化學(xué)試劑的四大稱謂,快接招:以來歷為根底的稱謂進(jìn)口試劑、天然物獲取、浸膏、干粉、獲取物……以習(xí)慣為根底的稱謂:化學(xué)藥品、精密化學(xué)品、藥品、冷偏試劑、特種試劑、一類試劑、二類試劑、三類試劑、小種類試劑……以含量為根底的稱謂規(guī)范物質(zhì)、規(guī)范溶液、規(guī)范雜質(zhì)溶液、規(guī)范對(duì)照品、規(guī)范樣品、行標(biāo)試劑、指示試劑、基準(zhǔn)物質(zhì)、基準(zhǔn)試劑、化學(xué)基準(zhǔn)、化學(xué)規(guī)范、儀器規(guī)范、剖析試劑、一類試劑、二類試劑、超純?cè)噭?、高純?cè)噭?、?dāng)量試劑、醫(yī)藥規(guī)范、光譜純、色譜純、電子純、鋼鐵標(biāo)樣、生鐵標(biāo)樣、煤標(biāo)樣、礦石標(biāo)樣
人輪狀病毒IgA(RV-IgA)ELISA試劑盒操作步驟2019/04/17
人輪狀病毒IgA(RV-IgA)ELISA試劑盒操作步驟1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒操作步驟2019/04/12
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在
ELISA酶免疫技術(shù)類型2019/04/04
酶免疫技術(shù)類型酶免疫技術(shù)按照抗原抗體系統(tǒng)是定位于組織細(xì)胞上還是存在于液體樣品中分為酶免疫組化技術(shù)和酶免疫測(cè)定(EIA),酶免疫測(cè)定又可分為均相酶免疫測(cè)定和異相酶免疫測(cè)定。(一)均相酶免疫測(cè)定均相酶免疫測(cè)定是利用酶標(biāo)記物結(jié)合成抗原抗體復(fù)合物后,標(biāo)記酶的活性就受到抑制,因而反應(yīng)后不需分離結(jié)合的和游離的酶標(biāo)記物,直接測(cè)定系統(tǒng)中的總標(biāo)記酶的活性的變化,即可確定結(jié)合的酶標(biāo)記物的數(shù)量,從而得到待測(cè)物的含量的一種技術(shù)。常用于半抗原或小分子抗原如藥物、激素等的測(cè)定。常用的技術(shù)類型有:1.酶免疫增強(qiáng)測(cè)定技術(shù)(EM
ELISA的主要常用類型及步驟2019/03/27
ELISA試劑盒的主要常用類型及步驟1.間接法測(cè)抗體間接法是檢測(cè)抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(二抗)以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原,洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。2)加稀釋的樣本,保溫反應(yīng)。樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。3)加酶標(biāo)抗抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗抗體結(jié)合,從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體
每種試劑都有其反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素2019/03/21
每種試劑都有其反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),會(huì)造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。作為記錄測(cè)定結(jié)果的儀器,酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。首先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進(jìn)行保養(yǎng),對(duì)濾光片要定期校正;其次酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)置要正確,使用雙波長(zhǎng),一個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng),一個(gè)參比波長(zhǎng),以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,ELISA試劑盒在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)先擦試微
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)前幾點(diǎn)準(zhǔn)備工作2019/03/13
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:1.請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。2.將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超過50℃,使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫)。當(dāng)日使用。3.標(biāo)準(zhǔn)品:于10000×g離心1分鐘,加入標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,旋緊管蓋,靜置10分鐘,上下顛倒數(shù)次,待其充分溶解后,用移液器將其輕輕混勻(濃度為
特推出ELISA試劑盒HRP的制備方法分享2019/03/07
ELISA試劑盒HRP的制備方法1).水提?。悍Q取5kg用水沖刷干凈的鮮辣根(辣根皮中亦含有豐富的HRP),用菜刀切成小碎塊,在絞肉機(jī)中絞碎1~2次。碎渣漿用1倍體積的水低溫下攪拌提取過一夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干機(jī)(或離心機(jī))甩干,收集濾液,碎渣再用1/4倍體積水浸泡提取1次,合并2次濾液,測(cè)得總體積。2).硫酸銨分級(jí)分離:在不斷攪拌下,每1000mL濾液中慢慢加入226g硫酸銨粉末(相當(dāng)于0.40飽和度,0℃),大約在1~2h內(nèi)加完,置冷室中放置過一夜。次日將上清液小心地用虹吸管
在elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中,只有遵循它應(yīng)有的規(guī)則才能更好的完成實(shí)驗(yàn)2019/02/26
試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白介素elisa試劑盒水平。用純化的人白介素elisa試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素,再與HRP標(biāo)記的白介素抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白介素含量。根據(jù)前面說到的elisa質(zhì)量控制中我們知道,由ELISA的性質(zhì)
分享ELISA檢測(cè)試劑盒新手入門的使用技術(shù)2019/02/15
公司技術(shù)專員為ELISA檢測(cè)試劑盒新手入門的使用技術(shù)報(bào)告做出一番整理,在這里分享給您供參考。ELISA方法原理1.雙抗體(原)夾心法:檢測(cè)抗原(體)的常見方法,應(yīng)用針對(duì)抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測(cè)溶液中的抗原(適用于二價(jià)以上抗原,不能測(cè)小分子半抗原)。2.間接法:檢測(cè)抗體的方法,利用酶標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)檢測(cè)已與固相抗原結(jié)合的抗體。3.競(jìng)爭(zhēng)法:檢測(cè)抗原或小分子半抗原、抗體,以測(cè)抗原為例,使待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,結(jié)果如待測(cè)抗原含量越多,與固相抗體結(jié)
ELISA試劑盒不具有水溶性,只有讓它們?nèi)茉谝掖贾胁拍芨玫厥褂?/a>2019/01/29
近日,記者發(fā)現(xiàn):花露水的主要成分是乙醇,其含量多在50%~80%之間。國(guó)家對(duì)花露水的乙醇含量規(guī)定是大于30%。乙醇即酒精,在常溫常壓情況下屬于易燃物,在24攝氏度的常溫下遇到明火就可以燃燒。那么花露水中為什么一定要有乙醇呢?ELISA試劑盒堅(jiān)決控制新污染專家解釋說,一方面是因?yàn)槠渚哂袣⒕镜淖饔?,另一方面是因?yàn)樗鼘?duì)有機(jī)物的可溶性。各種品牌的花露水中都會(huì)含有一定的避蚊氨或是驅(qū)蚊脂一類的有機(jī)化合物,ELISA試劑盒這些化合物均不具有水溶性,只有讓它們?nèi)茉谝掖贾胁拍芨玫厥褂?。西華大學(xué)物理與化學(xué)學(xué)院
ELISA試劑盒檢驗(yàn)結(jié)果分析及性能指標(biāo)2019/01/09
ELISA試劑盒自創(chuàng)立以來,經(jīng)歷過輝煌,也經(jīng)歷過挑戰(zhàn),通過各個(gè)部門所有職員的共同努力,密切關(guān)注生命科學(xué)研究的發(fā)展,鍥而不舍地追求更的和更高品質(zhì)、更創(chuàng)新的品牌,在行業(yè)內(nèi)擁有較高度,深得新老客戶的厚愛。檢驗(yàn)結(jié)果分析及性能指標(biāo):1)通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,檢測(cè)未知濃度的OD值,對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線找欲測(cè)目標(biāo)物濃度。2)通過觀察方法,酶標(biāo)儀450nm檢測(cè)OD值。3)空白對(duì)照不加HRP標(biāo)記的抗體/抗原和陰性對(duì)照結(jié)果應(yīng)無色,陽性對(duì)照及加HRP標(biāo)記的抗體/抗原產(chǎn)生深藍(lán)色產(chǎn)物。4)外觀與結(jié)構(gòu),顯色液A應(yīng)為淡黃色透明液體,顯色
ELISA試劑盒供應(yīng)商檢查中顯色液A和B有啥效果2018/12/18
ELISA試劑盒供應(yīng)商酶聯(lián)免疫確診試劑盒的底物A即是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B即是顯色劑B(含TMB),用于顯色。別的,常用的底物還有:AP的底物,常用的為對(duì)-硝基苯磷酸脂(PNP),其反響物為黃色的對(duì)硝基酚,測(cè)讀波長(zhǎng)為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對(duì)硝基藍(lán)四氮唑,反響商品為不溶性的藍(lán)色沉積啥是TMB?TMB即四甲基聯(lián)苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強(qiáng)的基團(tuán),因而簡(jiǎn)略進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反響,且因?yàn)檫@種
如何縮小ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)誤差呢2018/12/06
ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)雖說操作簡(jiǎn)便,但在實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)誤差為在所難免的情況試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差概率。如何縮小實(shí)驗(yàn)誤差呢?在操作的過程中,要從自然因素(試劑穩(wěn)定性、準(zhǔn)確率、儀器精密度)和人為因素(操作者)兩個(gè)方面入手。實(shí)驗(yàn)過程中我們除了需要多點(diǎn)細(xì)心之外,還有一些需要重點(diǎn)注意的地方??s小ELISA實(shí)驗(yàn)誤差,現(xiàn)在為您支招:一、檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。二、使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤
ELISA試劑盒價(jià)格的三個(gè)必要的試劑與完整試劑盒組分2018/12/04
ELISA試劑盒價(jià)格在臨床檢驗(yàn)中一般選用商品試劑盒進(jìn)行測(cè)定。ELISA中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:1,酶的底物;2,洗滌液;3,酶反應(yīng)停止液。4,結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;5,酶符號(hào)的抗原或抗體(結(jié)合物);6,已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);7,陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和操控血清(定量測(cè)定中)
ELISA試劑盒價(jià)格應(yīng)用中效果的評(píng)價(jià)2018/11/27
ELISA試劑盒價(jià)格由于凈化過程中引入的溶劑,可能會(huì)降低待測(cè)組分的濃度或者不適宜直接分析,需要去除全部有機(jī)溶劑。即ELISA試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈?,再用?fù)溶液溶解干燥殘留物。濃縮方式:氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。注意:1在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。2在吹樣本時(shí),針頭應(yīng)在液面上空,避免與樣本接觸,防止產(chǎn)生交叉污染。3樣本吹干后應(yīng)立即取下,避免吹的時(shí)間過長(zhǎng),影響終檢測(cè)結(jié)果。4不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。5凈化經(jīng)過提取的待
ELISA試劑盒批發(fā)定性及定量的原理2018/11/22
ELISA試劑盒批發(fā)定性是指判定物質(zhì)有無的屬性;定量是指判定物質(zhì)的用量,定量的前提是定性,目前生化試劑大都為定量檢測(cè)。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是具有一種或幾種物理或化學(xué)性質(zhì)已經(jīng)充分確定,并用于校正儀器、評(píng)價(jià)一種測(cè)量方法的物質(zhì);而校準(zhǔn)物是一種用于校準(zhǔn)、分度或修正測(cè)量值的物質(zhì)或裝置,這種物質(zhì)和裝置必須跟蹤國(guó)家或的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或裝置;校準(zhǔn)物是公司用來校準(zhǔn)某檢測(cè)系統(tǒng)(儀器+試劑+方法)的;質(zhì)控品與校準(zhǔn)品的區(qū)別:組成成份不一樣;溯源的要求不一樣;用途不一樣。將樣品加入孔中并孵育,假如其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì)與H
ELISA試劑盒價(jià)格樣品因子的干擾因素2018/11/20
ELISA試劑盒價(jià)格干擾因素,包括內(nèi)源性因素和外源性因素的標(biāo)本,前者包括類風(fēng)濕因子,補(bǔ)體,嗜異性抗體,抗體,溶菌酶,后者包括溶血標(biāo)本,被細(xì)菌污染,樣品儲(chǔ)存時(shí)間過長(zhǎng),試樣凝固不全,重復(fù)冷凍和解凍冷凍標(biāo)本。抗原或抗體固定在一個(gè)過程被稱為涂層(涂料)。ELISA試劑盒換句話說,涂層是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合,取決于在固相的疏水性基團(tuán)和疏水基團(tuán)的相互作用在載體表面的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)。物理吸附是非特異性的,其分子量的影響,蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)的影響,濃度等。人ELI
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