北京眾力挽生物科技有限公司
郝運興
Thermo NanoDrop 2000紫外/可見分光光度計 是NanoDrop的產(chǎn)品，應(yīng)用液體的表面張力特性，樣品體積只需要 0.5~2ul，在檢測臺上，經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細管等耗材檢測吸收值的優(yōu)點。此產(chǎn)品設(shè)計受保護，并在*廣受歡迎，其準(zhǔn)確度與便利性讓科學(xué)家得以更有效率進行各項研究。
NanoDrop 2000使用高能量氙燈（pulsed xenon flash lamp）可提供190~840nm的全光譜檢測，且不需要暖機，開機后立即使用。搭配高感度CCD array檢測器，檢測吸收值可高達300Abs（dsDNA濃度2~15000ng/ul），大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測。
待測樣品的均質(zhì)性是NanoDrop 2000的zui高要求，一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測前以vortex mixer震勻為*，若無vortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔(dān)心genomic DNA可能因前述動作而斷裂，則改以55?C加熱約一分鐘，使樣品在偵測前呈現(xiàn)均勻狀態(tài)，以確保 2ul 具有代表性。
檢測時選擇不同檢測模式，可以得到zui快速的結(jié)果：
● Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)）。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì)，須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)（mass extinction coefficient）方可計算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果，自動畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算R square，待測蛋白質(zhì)濃度。
* 蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑，因呈色劑隨時間會逐漸加深，使用前請詳閱試劑說明書并制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，在*時間內(nèi)完成檢測，以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。每個標(biāo)準(zhǔn)曲線zui多可有七個標(biāo)準(zhǔn)品，每個標(biāo)準(zhǔn)品zui多可做五重復(fù)。
* 測蛋白質(zhì)時樣品體積需使用 2ul，每個樣品檢測后需以Kimwipes 低塵擦拭紙（編號： 34155 ）擦拭15~20回，以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。
Thermo NanoDrop 2000紫外/可見分光光度計 產(chǎn)品描述：
NanoDrop ND-2000C為NanoDrop ND-2000的升級版本，ND-2000C具有ND-2000全部功能，除此之外，它還有以下突出特點：
1、檢測耗時更短，僅需3秒鐘；
2、具比色杯或者檢測孔兩種選擇，適合檢測各種類型的樣本，包括易揮發(fā)性物質(zhì)的檢測；
3、檢測范圍更加寬泛，檢測下限可低至0.4 ng/μl （dsDNA）；
4、內(nèi)置比色杯，可進行實時動力學(xué)曲線研究，或者OD600細胞濃度的測量。
技術(shù)參數(shù)：
檢測孔測量時:
1、波長范圍: 190-840nm；
2、波長精度: 1nm；
3、分辨率: <1.8 nm （FWHM at Hg 253.7 nm）；
4、其它: 1mm光程長度（可自動調(diào)整到0.05mm）；
5、檢測下限：2ng/μl（dsDNA）；
6、檢測上限：15000ng/μl（dsDNA）；
7、吸光率精確度：0.002 absorbance （1mm光程）；
8、吸光率準(zhǔn)確性：2%（at 0.76 at 257 nm）；
9、吸光率范圍：0.02-300 （相當(dāng)于10mm光程）；
10、核酸檢測周期：< 5s；
11、體積：14cm×20cm。
比色杯測量時：
1、光柱高度：8.5 mm；
2、控溫精確，37 ± 0.5 °C；
3、攪拌速度: 150 – 850 rpm;
4、四種光徑可供選擇，分別為1，2，5，10mm；
5、吸光率范圍：0.002 – 1.5；
6、檢測下限：0.4 ng/μl （dsDNA）；
7、檢測上限：750 ng/μl （dsDNA）；
8、檢測時間：< 3 s；
9、重量：2.1 kg.
