產(chǎn)品中文名:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA)瓶裝顆粒
Product Name:Nutrient Agar
【產(chǎn)品用途】
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA)瓶裝顆粒用于細菌總數(shù)測定、純培養(yǎng)及保存菌種,也可用于消毒效果測定。
【檢驗原理】
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
【配方成分】
配方(每升)??含量
蛋白胨?? 10g
牛肉膏粉? ?3g
氯化鈉? ?5g
瓊脂?? 15g
最終pH 7.3±0.2
【使用方法】
1、稱取本品33g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
2、(食品)以無菌操作稱取檢樣25克(或25mL),放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠),充分振搖,即為1:10的均勻稀釋液。依次做1:100,1:1000……稀釋液。
3、根據(jù)對樣品污染情況的估計,選擇2—3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中,每個稀釋度做2個平皿。
4、稀釋液移入平皿后應(yīng)及時將涼至46℃左右的培養(yǎng)基注入平皿約15mL,并轉(zhuǎn)動平皿使混合均勻,同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。待瓊脂凝固后,倒置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)48±2h。
5、觀察結(jié)果。
6、菌落計數(shù)方法:
做平板菌落計數(shù)時,可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏,在計下各平板的菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。
7、菌落計數(shù)的報告:
選取菌落數(shù)在30—300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)。一個稀釋度使用兩個平板,應(yīng)采用兩個平板平均數(shù),其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù),若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個菌落;如有不同來源的幾條鏈,則應(yīng)將每條鏈視為一個菌落計
A:稀釋度的選擇:
應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30—300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)報告之(見附表)。
若有兩個稀釋度.其生長的菌落數(shù)無均在30—300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2,則應(yīng)報告其平均數(shù);若大于2則報告其較小的數(shù)字(見表中例2及3)。
若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300則應(yīng)按稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例4)。
若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)按稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例5)。
若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例6)。
若有稀釋度的平均菌菌落數(shù)均不在30—300之間,其中一部分大于300或小于30時,則以30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例7)。
菌落數(shù)的報告:
菌落數(shù)在100以內(nèi)時,按其實有數(shù)報告,大于100時,采用二位有效數(shù)字,在二位數(shù)字后面的有效數(shù)值,以四舍五入法計算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù),也可以用10的指數(shù)來表示(見表中“報告方式欄”)。
【質(zhì)量控制】
1. 外觀方面
淡黃色顆粒,高壓滅菌后呈淡黃色透明無沉淀,傾注平皿冷卻后呈淡黃色凝膠。
2. 生物學(xué)方面
下列質(zhì)控菌株接種待測試培養(yǎng)基,36℃±1℃培養(yǎng)18~24h,結(jié)果如下:
【儲存條件及保質(zhì)期】
貯存于避光、陰涼干燥處;貯存期三年。