客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱:Cy3
規(guī)格:5 mg/25 mg/50 mg
貨號(hào):BJP1116
分類:熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
染料法
探針?lè)ā?/span>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
·完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針?lè)ǎ?/span>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。
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檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Talin-1 (C45F1) Rabbit mAb20 ul
人牙周膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Talin-1 (C45F1) Rabbit mAb100 ul
人肺癌組織源細(xì)胞說(shuō)明書(shū)MMP-2 Antibody100 ul
大鼠顱骨成骨細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Fyn Antibody20 ul
大鼠腦成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Fyn Antibody100 ul
小鼠肺成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Desmin Antibody100 ul
小鼠頜下腺上皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Phospho-NF-κB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
C2C12(小鼠成肌細(xì)胞)價(jià)格α-Parvin Antibody100 ul
U-87 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)價(jià)格Phospho-AMPA Receptor 2 (GluA2) (Tyr876) Antibody500 ul
SF17(人腦瘤細(xì)胞)說(shuō)明書(shū)Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (violetFluor™ 450 Conjugate)100 ul
SNU-5(人胃癌細(xì)胞)說(shuō)明書(shū)Phospho-SATB1 (Ser47) Antibody100µl
SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)E2F4 (E3G2G) Rabbit mAb100 ul
TE-10(人食管癌細(xì)胞)說(shuō)明書(shū)Phospho-SMC1 (Ser360) Antibody100 ul
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)價(jià)格Phospho-p53 (Ser15) (16G8) Mouse mAb (Biotinylated)100 ul
3T6-Swiss albino(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)報(bào)價(jià)CaMKIV Antibody100 ul
人腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
人胎盤羊膜細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)CREB (48H2) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
Cy3Amycolatopsisdecaplanina種屬: Amycolatopsisdecaplanina分離基物: 土壤安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 158生長(zhǎng)條件: 28℃
Marinobacter│sp.分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Coniothyrium│minitans斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于研究盾殼霉孢子形成的分子機(jī)理培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 20℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌種屬: Zymomonas│mobilis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)基: CM0199生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Bacillus│thuringiensis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)蛋白酶培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Bacillus│thuringiensis分離基物: 玉米螟凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Arthrobotrys│yunnanensis分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 18生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Bacillus│thuringiensis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于分類學(xué)研究培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造酒精、制面包。培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ?,可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。