志賀氏菌的血清學(xué)鑒定方法！
志賀氏菌的血清學(xué)鑒定方法！
⒈抗原的準(zhǔn)備
志賀氏菌屬沒有動力，所以沒有鞭毛抗原。志賀氏菌屬主要有菌體（O）抗原。菌體O 抗原又可分為型和群的特異性抗原。
一般采用1.2﹪～1.5%瓊脂培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗(yàn)用的抗原。
備注1： 一些志賀氏菌如果因?yàn)镵 抗原的存在而不出現(xiàn)凝集反應(yīng)時(shí)，可挑取菌苔于1 mL 生理鹽水做成濃菌液，100℃煮沸15 min～60 min 去除K 抗原后再檢查。
備注2：D 群志賀氏菌既可能是光滑型菌株也可能是粗糙型菌株，與其他志賀氏菌群抗原不存在交叉反應(yīng)。與腸桿菌科不同，宋內(nèi)氏志賀氏菌粗糙型菌株不一定會自凝。宋內(nèi)氏志賀氏菌沒有K 抗原。
⒉凝集反應(yīng)
在玻片上劃出2 個(gè)約1cm×2cm 的區(qū)域，挑取一環(huán)待測菌，各放1/2 環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部，在其中一個(gè)區(qū)域下部加1 滴抗血清，在另一區(qū)域下部加入1 滴生理鹽水，作為對照。再用無菌的接種環(huán)或針分別將兩個(gè)區(qū)域內(nèi)的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動混合1 min，并對著黑色背景進(jìn)行觀察，如果抗血清中出現(xiàn)凝結(jié)成塊的顆粒，而且生理鹽水中沒有發(fā)生自凝現(xiàn)象，那么凝集反應(yīng)為陽性。
如果生理鹽水中出現(xiàn)凝集，視作為自凝。這時(shí)，應(yīng)挑取同一培養(yǎng)基上的其他菌落繼續(xù)進(jìn)行試驗(yàn)。
如果待測菌的生化特征符合志賀氏菌屬生化特征，而其血清學(xué)試驗(yàn)為陰性的話，則按5.5.1 備注1 進(jìn)行試驗(yàn)。
⒊血清學(xué)分型（選做項(xiàng)目）
先用四種志賀氏菌多價(jià)血清檢查，如果呈現(xiàn)凝集，則再用相應(yīng)各群多價(jià)血清分別試驗(yàn)。先用B 群福氏志賀氏菌多價(jià)血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如呈現(xiàn)凝集，再用其群和型因子血清分別檢查。如果B 群多價(jià)血清不凝集，則用D 群宋內(nèi)氏志賀氏菌血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如呈現(xiàn)凝集，則用其Ⅰ相和Ⅱ相血清檢查；如果B、D 群多價(jià)血清都不凝集，則用A 群痢疾志賀氏菌多價(jià)血清及1～12 各型因子血清檢查，如果上述三種多價(jià)血清都不凝集，可用C 群鮑氏志賀氏菌多價(jià)檢查，并進(jìn)一步用1～18 各型因子血清檢查。
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