產(chǎn)品名稱:豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)elisa試劑盒
英文名稱:Pig steroidacute regulatory protein,StAR ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
Porcine Bcl-2 Assaciated X protein, BAX 試劑盒腎臟髓質(zhì)肽(22-52),人Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Hydrocortisone, HYD 試劑盒咽側(cè)體抑制素ⅣPorcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Hydrocortisone, HYD 試劑盒糊精肽,人Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine nitric oxide, NO 試劑盒血管緊張素APorcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine nitric oxide, NO 試劑盒血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Endothelial nitric oxide synthase, eNOS 試劑盒血管緊張素原(1-14),大鼠Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Endothelial nitric oxide synthase, eNOS 試劑盒肯特肽抗體Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3, eNOS-3 試劑盒心房利鈉肽(1-28),大鼠Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3, eNOS-3 試劑盒心房利鈉肽(126-149)Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Angiopoietin 2, ANG-2 試劑盒心房利鈉肽(126-150),大鼠Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Angiopoietin 2, ANG-2 試劑盒心鈉素Ⅰ,大鼠Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2, Tie-2 試劑盒心鈉素Ⅱ,大鼠,小鼠,兔Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2, Tie-2 試劑盒心鈉素Ⅲ,大鼠Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Angiopoietin 1, ANG-1 試劑盒帶3蛋白質(zhì)(547-553),人Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine Angiopoietin 1, ANG-1 試劑盒帶3蛋白質(zhì)(824-829),人Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
Porcine acetylcholine receptor antibody, AChRab 試劑盒堿性成纖維生長因子Porcine/豬試劑盒規(guī)格:48T/96T
豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)elisa試劑盒transferrin轉(zhuǎn)鐵蛋白種屬: Azospirillum│biarilenseleo固氮螺菌屬
Transferrin receptor轉(zhuǎn)鐵蛋白受體種屬: Auricularia│auricula (Hook. f.) Underw.黑木耳(新科1號)
amyloid beta peptide總β淀粉樣蛋白種屬: Hygrophorus│speciosus Peck美麗蠟傘
Total cholesterol總膽固醇種屬: Claviceps│purpurea紫麥角菌
Total bilirubin總膽紅素種屬: Geobacillus│thurmoglucosidasius (55℃)熱葡糖苷酶芽孢桿菌
Total bile acide總膽汁酸種屬: Lentinula│edodes (Berk.) Pegler香菇?建B
Total protein總蛋白種屬: Ceriporiopsis│mucida (Pers.) Gilb. & Ryvarden霉擬蠟孔菌
Total thyroxine總甲狀腺激素種屬: Mucor│alpinus高山毛霉
T-AOC總抗氧化能力種屬: Aspergillus│flavus var. flavus Link黃曲霉黃色變種(不提供)
Total Tri-iodothyronine總?cè)饧紫僭彼岱N屬: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.矮抗P558(平菇類)
Podocalyxin足細胞標記蛋白;足盂蛋白種屬: Ensifer│teranga適宜劍菌
Prohibitin阻抑素種屬: DH5α StrainDH5α大腸桿菌克隆菌株
Histidine decarboxylase組氨酸脫羧酶種屬: Ganoderma│australe (Fr.) Pat.平蓋靈芝
Histamine組胺種屬: Lyophyllum│shimeji玉蕈離褶傘(真姬菇)
Histamine N-methyltransferase組胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶種屬: Fusarium│sacchari甘蔗鐮孢菌