特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:乙型肝炎(HBV)核酸提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:YS-P013213
產(chǎn)品規(guī)格:32次/盒、50次/盒
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)阿卡波糖乙脫氫酶家族3成員A1抗體
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)阿卡波糖(標準品)磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體
人激活素A(ACVA)阿昔洛韋,無環(huán)鳥苷γ2肌動蛋白抗體
人脂聯(lián)素(ADP/Acrp30)阿昔洛韋,無環(huán)鳥苷(標準品)gp130結(jié)合蛋白GAM抗體
人Agouti相關(guān)蛋白(AgRP)腺苷;腺嘌呤核苷繆勒激素2型受體抗體
人血管生成素(ANG)腺嘌呤核苷(腺苷)(標準品)激活素受體1A抗體
人促血管生成素1(ANG1)鹽酸阿地芬寧激活素受體2A抗體
人促血管生成素2(ANG2)鹽酸阿地芬寧(標準品)激活素受體2B抗體
人B活化因子 (BAFF/CD257) 醋酸阿拉瑞林/氨瑞林 2號染色體開放閱讀框88抗體
人腦源性神經(jīng)因子(BDNF) 阿侖磷酸鈉G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體
人骨成型蛋白2 (BMP-2) 阿侖磷酸鈉激活素受體1B抗體
人骨成型蛋白4 (BMP-4) 別嘌雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體
人骨成型蛋白7 (BMP-7) 別嘌(標準品)淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端)
人上皮型鈣黏蛋白 (E-Cad) 烯基雌;烯雌腺苷酸環(huán)化酶2抗體
人碳酸酐酶IX (CA9)烯基雌(標準品)載脂蛋白C3抗體
人胱天蛋白酶1(P1)前列地爾,前列腺素E1載脂蛋白E4抗體
乙型肝炎(HBV)核酸提取試劑盒GAPDH(3E12) 3-磷酸甘油脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)(R)-(-)-3-甲基-2-丁 98%, ee 97%
GAPDH 兔抗3-磷酸甘油脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)(S)-(+)-3-甲基-2-丁 98+%, ee 99%
Beta-Actin β-肌動蛋白抗體(內(nèi)參抗體)2-氨基苯甲 99%
14-3-3 14-3-3蛋白抗體DL-3-氨基丁酸 97%
phospho-14-3-3 (Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體脫落酸(合成) 99%
14-3-3 family protein 蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)DL-氨酰-DL-氨酸 97%
2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸(除草劑)抗體親合素 12 U/mg
2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體1-萘-5-磺酸 90%