特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:樣本保存液(不含染料)
產(chǎn)品貨號:YS-P013246
產(chǎn)品規(guī)格: 2.5L
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
人碳酸酐酶II(CA2)硫酸長春堿α1,4-N-乙酰葡糖轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體
人一氧化碳血紅蛋白(HbCO) 硫酸長春堿(標準品)芳香乙酰脫乙酰基酶抗體
人癌胚抗原(CEA) 硫酸長春堿(進分)芳香乙酰脫乙?;笜拥鞍?抗體
人錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1) 替莫唑氨基乙二酸半脫氫酶磷酸泛酰巰基乙轉(zhuǎn)移酶抗體
人心肌肌鈣蛋白T(c/TNNT2) 替莫唑(標準品)賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體
人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1) 氨魯米特錨蛋白重復(fù)域6抗體
人白介素7(IL-7) 氨魯米特(標準品)精氨酸酶2抗體
人心肌肌鈣蛋白I(cTn-I/TNNI3)氟他固酮還原酶家族1成員C3抗體
人心肌營養(yǎng)素合成酶/心磷脂合酶(CLS) 氟他(標準品)促腎上腺皮質(zhì)激素受體
人心肌營養(yǎng)素1(CT-1) 環(huán)磷酰褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體
人心肌營養(yǎng)素樣因子1(CLCF1) 環(huán)磷酰(標準品)腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體
人蛋白酶激活受體1(PAR1)醋酸地塞米松Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體
人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP) 醋酸地塞米松(標準品)腺相關(guān)病5 VP1抗體
人胱天蛋白酶10(P10) 甲氧芐啶脂肪脫氫酶抗體
人胱天蛋白酶11(P11) 甲氧芐啶(標準品)抗利尿激素1A抗體
人胱天蛋白酶12(P12) 西維來司鈉抗利尿激素受體1B抗體
樣本保存液(不含染料)Aurora B 有絲分裂激酶B抗體二十六烷 分析標準品, ≥99.5% (GC)
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體七氟丁酸 離子色譜級
Aurora A/B/C 有絲分裂激酶A/B/C抗體DL-高半胱氨酸 95%
B7-H1/CD274 程序性死亡配體1抗體5-羥甲基糠 分析標準品,>99%
B7-DC/CD273 程序性死亡配體2抗體1,2-十六烷二 95%
ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體正庚烷 Standard for GC,>99.5%(GC)
B7H4 B7-H4抗體8-羥基喹啉-5-磺酸 水合物 98%
BACE/ASP2 β分泌酶抗體二十一烷 分析標準品,≥99.5% (GC)