公司向您推薦Primarker™人骨髓單核細(xì)胞鑒定試劑盒的詳細(xì)說(shuō)明：
產(chǎn)品名稱 | Primarker™人骨髓單核細(xì)胞鑒定試劑盒 |
規(guī)格 | 6次/盒 |
貨號(hào) | YS-X6947 |
細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋?xiě)腋〖?xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
?
實(shí)驗(yàn)操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。
b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。
e．剔除胚胎周?chē)陌ぃ瑢⑴咛シ庞跓o(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺(tái)；
血樣品固著（Acetic alcohol固著） 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50毫升
細(xì)菌凍存培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升
大鼠腎上腺總RNA 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20微克
細(xì)菌核糖體分離試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次
肝脾組織樣品固著（Helly固著） 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50毫升
pADEASY- pSHUTTLE＋目的基因 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：腺病毒
植物淀粉酶（AMYLASE）總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次
飼料氮含量克爾道（Kjeldahl）法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次
組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次
通用型禽白血病A/B/C亞型（ALV-A/B/C）基因檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次
組織PHKG2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次
RhoC鳥(niǎo)苷酸酶活性分析試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：6次
Primarker™人骨髓單核細(xì)胞鑒定試劑盒催素(PRL)重組蛋白英文名稱：Recombinant Prolactin (PRL)
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisCaki-1, 人腎透細(xì)胞皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞
0.5M Tris-Cl(pH6.8)500ml國(guó)產(chǎn)
木糖-明膠培養(yǎng)基發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
改良Frey氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Frey Medium Modified Base250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
HEp-2(人喉表皮樣細(xì)胞)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞枝芽胞菌 Virgibacillus sp.
特異青霉(點(diǎn)青霉) Penicillium notatumNCI-H1299(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)
人氣管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
可視型中分子量蛋白Marker酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris
脫氧膽酸（?；蛲茫?/font>/去氧膽酸/3α，12α-二羥-5β-膽烷酸/Deoxycholic acidBR，99%，10/100/500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
