商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6726 |
商品介紹:
測定意義
哺乳動物血液中的葡萄糖稱為血糖,是其體內(nèi)糖的主要運輸形式。血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和激素的調(diào)節(jié)而保持相對穩(wěn)定,調(diào)節(jié)失衡時出現(xiàn)高血糖和低血糖。糖尿病、顱內(nèi)壓增加和脫水癥等均可引起高血糖;飯后,精神緊張也可出現(xiàn)生理性高血糖。相反,胰島β細胞增生或腫癌等,垂體、腎上腺皮質(zhì)和甲狀腺功能減退,以及嚴重肝病患者均可出現(xiàn)低血糖癥狀。此外,饑餓和劇烈運動可引起暫時的低血糖。
測定原理:
葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 BR2,6-二叔丁基對甲酚 CP,98%PCA-1/Yo(Human purkinje cell autoantibody) ELISA Kit 人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體
LEB增菌液 BR對甲苯磺酸,—水 AR,99%Human anti-Sa-antibody ELISA Kit 人抗Sa抗體
李氏增菌液基礎 BRDL- 99%ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體
水解乳蛋白 BRDL- ≥99%, FCChnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體
麥芽浸膏 BR甘 AR,99.5-100.5%anti-Q-Ab(Human anti-Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q熱抗體
麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 BR甘 分析標準品PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體
霉菌液體培養(yǎng)基 BR甘 藥典級,Ph. Eur., BP, USP, 99-101%Human anti-PL7-antibody ELISA Kit 人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成
麥芽浸膏湯 BR甘 用于電泳, ≥99%PL12/AlaRS(Human anti-PL12-antibody) ELISA Kit 人PL12抗體/抗氨酰tRNA合成
血糖含量可見分光光度法檢測試劑盒反三碘甲狀腺原(rT3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
小鼠芳香免疫試劑盒進口、組裝
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)免疫試劑盒進口、組裝
豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒進口、分裝
凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
流感A病毒(FluA)抗體(IgA)免疫試劑盒進口、分裝
軟骨糖蛋白39(HC gp-39)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
二氫樣2(DPYSL2)免疫試劑盒進口、分裝
骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)免疫試劑盒*直銷
兔子神經(jīng)生長因子(NGF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。