牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測試劑盒說明書注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 編號 |
牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測試劑盒說明書 | Bovine Viral Diarrhea Virus 2 (BVDV2)2RTPCR | YS-R31951 |
牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測試劑盒說明書使用及效果:
CR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中Z小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
4-(溴基)吡啶鹽酸鹽73870-24-34-(溴基)吡啶鹽酸鹽73870-24-3
4,6-二氯煙酸73027-79-94,6-二氯煙酸73027-79-9
4-叔氧羰基氨基哌啶73874-95-04-叔氧羰基氨基哌啶73874-95-0
4-氨基-5-氯-2-氧基苯酸7206-70-44-氨基-5-氯-2-氧基苯酸7206-70-4
4-氨基-5-咪唑酰胺鹽酸鹽72-40-24-氨基-5-咪唑酰胺鹽酸鹽72-40-2
4-氨基-5-羥基基-2-基嘧啶73-67-64-氨基-5-羥基基-2-基嘧啶73-67-6
4-氨基-6-氧基嘧啶696-45-74-氨基-6-氧基嘧啶696-45-7
-3-羧酸7418-65--3-羧酸7418-65-7
4-苯基-1-烯768-56-94-苯基-1-烯768-56-9
4-氟苯炔766-98-34-氟苯炔766-98-3
4-基-3-硝基苯酸酯19930774-基-3-硝基苯酸酯1993077
4-炔基苯醚768-60-54-炔基苯醚768-60-5
牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測試劑盒說明書進(jìn)口/國產(chǎn)3-碘苯酸酯:58313-23-83-碘苯酸酯
進(jìn)口/國產(chǎn)鹽酸異嗪:58-33-3鹽酸異嗪
進(jìn)口/國產(chǎn)2-巰基苯并咪唑:583-39-12-巰基苯并咪唑
進(jìn)口/國產(chǎn)2-基環(huán)己醇:583-59-52-基環(huán)己醇
進(jìn)口/國產(chǎn)2-基環(huán)己酮:583-60-82-基環(huán)己酮
進(jìn)口/國產(chǎn)碳酸鉀:584-08-7碳酸鉀
進(jìn)口/國產(chǎn)2-溴呋喃:584-12-32-溴呋喃
進(jìn)口/國產(chǎn)2-氯異煙酸酯:58481-11-12-氯異煙酸酯
進(jìn)口/國產(chǎn)基烯酸叔酯:585-07-9基烯酸叔酯
進(jìn)口/國產(chǎn)3-叔基苯酚:585-34-23-叔基苯酚
牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測試劑盒說明書特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。