ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | AQP-0大鼠水通道蛋白0ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Rat Aquaporin 0, AQP-0 Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-R64563 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
動(dòng)力蛋白激活蛋白亞基3抗體英文全稱FTH英文簡(jiǎn)稱FTH檢測(cè)范圍3012nmol/L-200ng/ml
大腦發(fā)育同源蛋白2抗體英文全稱CYP2B6英文簡(jiǎn)稱CYP2B6檢測(cè)范圍3013nmol/L-50ng/mL
腦發(fā)育同源蛋白1抗體英文全稱Arachidonate-15-Lipoxygenase英文簡(jiǎn)稱ALOX15檢測(cè)范圍3014nmol/L-100ng/mL
線粒體2,4-雙烯酰輔酶A還原酶1抗體英文全稱15-OH-PGD2H英文簡(jiǎn)稱15-OH-PGD2H檢測(cè)范圍3015nmol/L-20ng/mL
Dab2相互作用蛋白抗體英文全稱LOX-5英文簡(jiǎn)稱LOX-5檢測(cè)范圍3016nmol/L-800pg/mL
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體英文全稱anti-prothrombins IgM antibodies英文簡(jiǎn)稱aPT1-IgM檢測(cè)范圍3017nmol/L-24ng/mL
細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體英文全稱Semaphorin 7A英文簡(jiǎn)稱SEMA7A檢測(cè)范圍3018nmol/L-8ng/mL
熱休克蛋白家族40抗體英文全稱Transcription factor EB英文簡(jiǎn)稱TFEB檢測(cè)范圍3019nmol/L-2000pg/mL
GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體英文全稱Ribonuclease A3英文簡(jiǎn)稱RNASE3檢測(cè)范圍3020nmol/L-400ng/mL
細(xì)胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗體英文全稱Ribonuclease A1英文簡(jiǎn)稱RNASE1檢測(cè)范圍3021nmol/L-480ng/mL
跨膜蛋白16A/鈣激活離子通道抗體英文全稱Golgi integral membrane protein 4英文簡(jiǎn)稱GOLIM4檢測(cè)范圍3022nmol/L-80ng/mL
退行性精母細(xì)胞同源物1抗體英文全稱Multiple epidermal growth factor-like domains protein 8英文簡(jiǎn)稱MEGF8檢測(cè)范圍3023nmol/L-8000pg/mL
7脫氫膽固還原酶抗體英文全稱low-density lipoprotein-receptor-related protein 2英文簡(jiǎn)稱LRP-2檢測(cè)范圍3024nmol/L-4000pg/mL
DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激酶2抗體英文全稱Notch-2英文簡(jiǎn)稱Notch-2檢測(cè)范圍3025nmol/L-20ng/mL
鉀通道蛋白DRK1抗體英文全稱Collagen alpha-2(V) chain英文簡(jiǎn)稱COL5A2檢測(cè)范圍3026nmol/L-8ng/mL
肌相關(guān)蛋白DAG1抗體英文全稱Leucine-rich repeat and immunoglobulin-like domain-containing nogo receptor-interacting protein 1英文簡(jiǎn)稱LINGO1檢測(cè)范圍3027nmol/L-20ng/mL
小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒LAMTOR5/HBXIP (D4V4S) Rabbit mAb100 ul
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒 Diap1 (E1E4K) Rabbit mAb100 ul
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒PLA2G1B (D1T4C) Rabbit mAb100 ul
小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA試劑盒 CD38 Antibody100 ul
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒RanBP9 (D8M8D) Rabbit mAb100 ul
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒 PRMT6 (D5A2N) Rabbit mAb100 ul
小鼠Slit2 ELISA試劑盒 PTEN (D3Q6G) Mouse mAb100 ul
小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)ELISA試劑盒Hck (E1I7F) Rabbit mAb100 ul
AQP-0大鼠水通道蛋白0ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理DNA結(jié)合抑制因子2抗體Biphenyl-3-carboxylic acid別名: 分子式: C13H10O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
粒趨化蛋白2抗體Benzoyl-L-histidine別名: 分子式: C13H13N3O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
GATA結(jié)合蛋白5抗體Betamethasone 17,21-dipropiona別名: 分子式: C28H37FO7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
生長(zhǎng)分化因子9抗體2-Benzoyl-1,3,4,4a,5,8a-hexahydro-6(2H)-isoquinolinone別名: 分子式: C16H17NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
促代謝型谷氨受體4抗體1-Benzyl D-asparta別名: 分子式: C11H13NO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
GST標(biāo)簽蛋白抗體1-Benzyl L-asparta別名: 分子式: C11H13NO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
磷脂?；鞍拙厶?/font>-4抗體4'-Benzyloxyacetophenone別名: 分子式: C15H14O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
眼鏡蛇蛇蛋白抗體Benzyl 4-bromophenyl ketone別名: 分子式: C14H11BrO性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
