備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱 | Human adrenocorticotropic hormone (ACTH) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10265 |
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
異阿魏酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid Humancatecholamine,CAELISA試劑盒人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 ,英文名: FFA ELISA Kit
異補(bǔ)骨脂查爾酮;補(bǔ)骨脂乙素質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isobavachalcone 轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系試劑盒20 人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒Humanai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 96T/48T
異補(bǔ)骨脂二氫黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isobavachin humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人類似RIKENcDNA2610307008基因ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)試劑盒 Rat IL-1 Receptor Like 1,IL1RL1 ELISA Kit
異補(bǔ)骨脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Angelicin 小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)ELISA試劑盒 ,英文名: OCT4 ELISA Kit CLIAKitfoE(Humaelomerase)ELISAKit人端粒酶規(guī)格:48T/96T
MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 33889-69-9水飛薊汀廠家 Silicristin
小鼠原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)ELISA試劑盒 ,英文名: Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1 ELISA Kit 29782-68-1水飛薊寧說明書 Silydianin
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T 72581-71-6異水飛薊賓品牌 Isosilybin
人谷氨酸[NMDA]受體亞基ε-2(-2)抗體試劑盒 Human -2 Aibody ELISA Kit 510-30-5刺囊酸規(guī)格 Echinocystic acid
RatGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 17086-76-9杯莧甾酮廠家 Cyasterone
13476-25-0烏藥內(nèi)酯規(guī)格 Linderane 英文名稱RatGamma-aminobyricacidELISAKit大鼠γ氨基(GABA)規(guī)格:96T/48T
13463-28-0圣草苷廠家 Eriocitrin 英文名稱RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD)規(guī)格:96T/48T
134418-28-3脫水穿心蓮內(nèi)酯規(guī)格 dehydroandrographolide 英文名稱RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD)規(guī)格:96T/48T
134-01-0氯化芍藥素品牌 Peonidin chloride 英文名稱Ratf-β-HCGELISAKIT大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-β-HCG)規(guī)格:96T/48T
13395-02-3馬兜鈴內(nèi)酰胺規(guī)格 Aristololactam 英文名稱RatFXELISAKit大鼠凝血因子X(FX)規(guī)格:96T/48T
人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa進(jìn)口試劑盒英文名稱HumanPDGFELISAKit人血小板衍化生長因子(PDGF)規(guī)格:96T/48T 換規(guī)格換規(guī)格品牌 換規(guī)格
化線粒體DNA/RNA同步萃取試劑盒20 醉魚草皂苷Ⅳ規(guī)格 buddlejasaponin IV
RatInhibin,INH-AELISA試劑盒大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 24512-63-8梔子苷廠家 Geniposide
小鼠早期生長應(yīng)答因子2(EGR2)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR2 ELISA Kit 84687-43-4黃芪甲苷說明書 Astragaloside IV
膠原酶I(CollagenaseI)ELISA檢測試劑盒MonkeyCollagenaseIELISAKit 96T/48T 21967-41-9黃芩苷品牌 Baicalin
我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測,全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn),索取產(chǎn)品說明書。