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產(chǎn)品名稱:Cx內(nèi)切β1,4葡聚糖酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63659
商品介紹:
測定意義 Cx存在于細菌、真菌和動物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,Cx主要作用于非晶態(tài)纖維素和水溶性纖維素衍生物,隨機水解糖苷鍵,將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。 測定原理: 采用3,5-二硝基水楊酸法測定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
鈣非依賴性磷脂A2(iPLA2)聯(lián)免疫試劑盒棲植物潘隆尼亞湖桿Protein A (HRP Conjugate)
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顆粒K(GZMK)聯(lián)免疫試劑盒 阿姆斯特丹曲霉ATP2A1/SERCA1 (D54G12) Rabbit mAb
花生四烯脂加氧3(ALOXE3)聯(lián)免疫試劑盒 蒙氏假單胞CUEDC2 Antibody
色P450家族成員26A1(CYP26A1)聯(lián)免疫試劑盒 糙皮側(cè)耳FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb
血紅蛋白(HB)聯(lián)免疫試劑盒暗產(chǎn)色鏈霉FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb
全色C合(HCCS)聯(lián)免疫試劑盒 枯草芽孢桿PKR (D7F7) Rabbit mAb
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激IIα(CAMK2α)聯(lián)免疫試劑盒波羅的海萊茵海默氏PhosphoPlus® Chk2 (Thr68) Antibody Duet
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芳基硫酯B(ARSB)聯(lián)免疫試劑盒 大腸埃希氏桿APC2 Antibody
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硫乙酰肝蛋白多糖(HSPG)聯(lián)免疫試劑盒貪噬屬Phospho-Chk1 (Ser317) (D12H3) XP® Rabbit mAb
膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )聯(lián)免疫試劑盒 枯草芽孢桿CIN85 (D1A4) Rabbit mAb
HtrA絲肽1(HTRA1)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Thap11/Ronin Antibody
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NADPH氧化2抗體Human MAP2K5(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 5) ELISA Kit山羊白介4elisa檢測試劑盒說明書
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