公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:αLAfαL阿拉伯呋喃糖苷酶檢測(cè)試劑盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
檢測(cè)方法:微量法
貨號(hào):FS-01S63657
商品介紹:
測(cè)定意義 α-L-Af 是一種能夠水解非還原呋喃阿拉伯糖殘基的糖苷酶類,使細(xì)胞壁阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯甘露聚糖等中性糖不斷解離,促進(jìn)果膠的增溶和降解。由于果實(shí)成熟過(guò)程中常常伴隨著阿拉伯糖的喪失,該酶活性在果實(shí)成熟軟化中的研究具有重大意義。 測(cè)定原理: α-L-Af分解對(duì)硝基酚阿拉伯呋喃糖苷生成對(duì)-硝基苯,后者在400nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算α-L-Af活性。 自備用品: 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
鈣網(wǎng)蛋白氧化低密度脂蛋白抗體Calreticulin
ADP-核糖基轉(zhuǎn)移大鼠可溶性E選擇mono-ADP-ribosyltrans-ferase
ADP-核糖基轉(zhuǎn)移小鼠透明質(zhì)Adp-Ribosyltransferase
脯大鼠白介1可溶性受體ⅡProline
完整的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23小鼠胰高血糖樣肽1intact Fibroblast Growth Factor 23
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23的C端裂解片段EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體C Fibroblast Growth Factor 23
心房利鈉肽低密度脂蛋白復(fù)合物atrial natriuretic polypeptide
鈣調(diào)蛋白小鼠膽囊收縮/腸促肽calmodulin
鈣調(diào)蛋白大鼠17羥皮質(zhì)類固calmodulin
基質(zhì)金屬蛋白7小鼠腦腸肽matrix metalloproteinase 7
白細(xì)胞介33抗增殖核抗原抗體Interleukin 33
鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體2大鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷sodium-glucose cotransporter 2
DNA甲基轉(zhuǎn)移1大鼠17-酮類固DNA methyltransferase 1
DNA甲基轉(zhuǎn)移3抗IgE受體抗體DNA methyltransferase 3
S-腺苷蛋小鼠6酮前列腺S-Adenosyl-L-methionine
αLAfαL阿拉伯呋喃糖苷酶檢測(cè)試劑盒微量法正戊烷 AR,99%丁香 natural, ≥98%, FCCAnti-DBC1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠膀胱癌缺失基因1抗體IgG
正戊烷 農(nóng)殘級(jí)偏鈣 39-44% B2O3 basis, 31-37% CaO basis, powderAnti-DAPK1/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激1抗體IgG
正戊烷 for HPLC, ≥99.0%八-O-乙?;?D-(+)-蔗糖 98%Anti-DAPK2/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激2抗體IgG
正戊烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)β-D-葡萄糖五乙酯 98%Anti-DAPK3/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激3抗體IgG
間二 AR曲 99%Anti-DARPP32/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠多巴、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體IgG
木質(zhì)磺鈉 96%α-D(+)-五乙酰葡萄糖 98%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化多巴、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體IgG
1-十四烯 95%乙酰溴-α-D-葡萄糖 包含 1% CaCO3 穩(wěn)定劑, 98%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化多巴、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體IgG
1-十四烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)4,4'-四甲基二基二 98%Anti-phospho-Cyclin E(Thr395) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化周期E抗體IgG