商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96873 |
商品介紹：
名稱 HULEC-5a (肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞) (暫不供應(yīng)) 別稱HULEC-5a; HULEC-5A; Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a 年齡（性別）新生 組織來源肺 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 生物安全等級(jí)2 生長(zhǎng)培養(yǎng)基MCDB131＋10ng/ml EGF＋1μg/ml Hydrocortisone＋10mM L-glutamine＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
人 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
人 IFNAR2 / IFNABR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
人 IFNAR2 / IFNABR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
人 CEACAM8 / CD66b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
人 EDAR
HULEC-5a (肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞) 2 ug pSV2neo pSV2neo 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
2 ug pDEST22 pDEST22 低溫運(yùn)輸，-20℃保存脫氧膽酸鈉瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)DCLA250克大腸菌群的平板測(cè)定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng)
1只 硅膠膜離心吸附柱（大提）收集管 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)100克
2 ug pRetro-On pRetro-On 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 對(duì)蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)
1 管 JM109(DE3)大腸桿菌 JM109(DE3) E.coli Strain -80℃保存 15.6-1000 pg/mL 漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
1 g Hemoglobin（NO清除劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人CD34分子(CD34)ELISA試劑盒
100支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭（盒裝已滅菌） 常溫 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human C4b-binding protein beta chain
2 ug pUB6/V5 His lacZ pUB6/V5 His lacZ 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人醛脫氫家族16成員A1(ALDH16A1)ELISA試劑盒
100mL CHES Buffer,0.5M,pH9.5 CHES Buffer,0.5M,pH9.5 常溫保存 0.78-50 ng/mL 人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒
沙氏瓊脂培養(yǎng)基(SDA) Sabourauds Agar 250g 0.312-20 ng/mL 人鐵鉬輔因子硫化(MCS)ELISA試劑盒
1mL 纖連蛋白 ( 人血 ) Fibronectin(FN) From Human Plasma -20℃保存SOB肉湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)SOB Broth250克BR
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
