采用進(jìn)口抗體對國內(nèi)包被,博研生物優(yōu)勢供應(yīng)“人過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPAR-δ)ELISA試劑盒”,保證質(zhì)量,有任何質(zhì)量問題或客戶做不出實(shí)驗(yàn)結(jié)果均可免費(fèi)退換,咨詢:,添加客服:索取產(chǎn)品說明書。
產(chǎn)品名稱:人過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPAR-δ)ELISA試劑盒
貨號:BYS104205B
我公司ELISA試劑盒服務(wù)標(biāo)準(zhǔn):
1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng),客戶在使用過程中測不出結(jié)果,等等!)
2.全程技術(shù)指導(dǎo)。(包括售前的標(biāo)本收集,使用過程中不明白的地方,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給你去電)
3.提供免費(fèi)代測的服務(wù)。(你只需把標(biāo)本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時(shí)間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時(shí)間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù)。
人過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPAR-δ)ELISA試劑盒ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
方法一:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
技術(shù)問答:
問:小鼠TNF-α ELISA 我的標(biāo)本是細(xì)胞,我想要測的結(jié)果:抑制TNF的產(chǎn)生 空白組、模型組、藥物組,藥物組要成梯度抑制TNF的產(chǎn)生、請問Elisa方法的可以測嗎? 答:細(xì)胞可以測 但要分組,得到相應(yīng)的梯度值,計(jì)算結(jié)果。自己需要多查閱文獻(xiàn) 。
問:樣本怎么保存?
答:一周內(nèi)要用的樣本2-8℃保存,近期一個(gè)月左右要用的樣本-20℃保存,*保存樣本-80℃一年或者更長時(shí)間多久都可以用,避免反復(fù)凍融。
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試劑盒本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。