具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
產(chǎn)品名稱 | 茜素紅S骨細胞染色試劑盒 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
貨號 | CP100594 |
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。
其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
呼吸道合胞病毒RNA檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tauroursodeoxycholic acid1452?;切苋パ跄懰?/span>
腺病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Taurocholic acid814牛磺膽酸
核酸提取試劑(血清、血漿)48人份/盒、96人份/盒Tapentadol 1755919
丙型肝炎病毒核酸定量檢測試劑盒(PCR熒光探針法)48人份/盒Tanshinone IIB173973丹參酮IIB
結(jié)核分枝桿菌核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tanshinone IIA5682丹參酮IIA
小鼠上腺素(E)ELISA試劑盒 Hydroxyprogesterone 68-96-2 中文名:羥孕酮 分子式:C21H30O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠上腺素 英文名稱: Mouse 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EPI Dabigatran etexilate 中文名: 分子式:C34H41N7O5
小鼠上皮中性粒細胞活化肽elisa試劑盒 小鼠上皮中性粒細胞活化肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠上皮中性粒細胞活化肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠上皮中性粒細胞活化肽試劑盒、小鼠上皮中性粒細胞活化肽elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Iloperidone 133454-47-4 中文名:伊潘立酮 分子式:C24H27FN2O4
小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Diclofenac 15307-79-6 中文名:雙氯芬酸鈉 分子式:C14H10Cl2NNaO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 Ikshusterol 3-O-glucoside 112137-81-2 中文名: 分子式:C35H60O7
茜素紅S骨細胞染色試劑盒去氧鬼臼,去氧鬼臼脂素 HPLC≥98% 5mg 小鼠胸腺嘧啶核苷0酸化酶(TP)ELISA試劑盒 ,英文名: TP ELISA Kit
去氧拉巴醌 HPLC≥98% 5mg 兔子補體蛋白4(C4)ELISA檢測試劑盒RabbitCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T
全草含茜草萜酸 HPLC≥98% 5mg 犬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒 Canine Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA Kit
雀舌黃楊堿B HPLC≥98% 5mg 英文名稱humanPGE1ELISAKIT人前列腺素E1(PGE1)規(guī)格:96T/48T
肉桂酸肉桂醇酯 HPLC≥98% 5mg 蛋白激酶譜系*分析技術(shù)試劑盒5
軟木花椒素 HPLC≥98% 5mg Ratmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
軟脂酸β香樹精酯 HPLC≥98% 5mg 小鼠胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA試劑盒 ,英文名: TARC ELISA Kit
軟脂酸谷甾醇酯 HPLC≥98% 5mg 兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒rabbitoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 96T/48T
蕊木堿甲酯 HPLC≥98% 5mg 犬25羥基維生素D3(25 HVD3)試劑盒 Dog 25-hydroxy vitamin D3,25 HVD3 ELISA Kit
三裂尾草素(供應(yīng)商少) HPLC≥98% 5mg 英文名稱HuamnGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptideELISAKit人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)規(guī)格:96T/48T
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。